生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2004年
4期
368-374
,共7页
何丹%杨慧%晁开%林晴%黄华樑
何丹%楊慧%晁開%林晴%黃華樑
하단%양혜%조개%림청%황화량
癌胚抗原(CEA)%免疫毒素%抗原结合活性%内吞作用%凋亡%细胞毒性
癌胚抗原(CEA)%免疫毒素%抗原結閤活性%內吞作用%凋亡%細胞毒性
암배항원(CEA)%면역독소%항원결합활성%내탄작용%조망%세포독성
为了研究免疫毒素发挥生物学作用的全过程,构建了两种不同形式的基于假单胞菌外毒素(Pseudomonas exotoxin A,PE)的抗癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)免疫毒素CEA(Fv)/PE38/KDEL和PE35/CEA(Fv)/KDEL.用流式细胞术经间接免疫荧光法测定免疫毒素的抗原结合活性.免疫毒素的内化(internalization)通过间接免疫荧光标记的方法在激光共聚焦显微镜下进行检测,采用流式细胞术进行免疫毒素内化的定量分析.细胞凋亡采用FITC-annexin V/PI双荧光染色方法进行分析.用噻唑蓝(MTT)法测定免疫毒素的靶细胞杀伤功能.对两种形式的免疫毒素在各个功能阶段的性质进行研究和比较,全面展现了免疫毒素发挥生物学功能的过程及各个生物作用过程之间的相互影响,为详尽的机制研究和免疫毒素的进一步优化改造提供了重要的依据.
為瞭研究免疫毒素髮揮生物學作用的全過程,構建瞭兩種不同形式的基于假單胞菌外毒素(Pseudomonas exotoxin A,PE)的抗癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)免疫毒素CEA(Fv)/PE38/KDEL和PE35/CEA(Fv)/KDEL.用流式細胞術經間接免疫熒光法測定免疫毒素的抗原結閤活性.免疫毒素的內化(internalization)通過間接免疫熒光標記的方法在激光共聚焦顯微鏡下進行檢測,採用流式細胞術進行免疫毒素內化的定量分析.細胞凋亡採用FITC-annexin V/PI雙熒光染色方法進行分析.用噻唑藍(MTT)法測定免疫毒素的靶細胞殺傷功能.對兩種形式的免疫毒素在各箇功能階段的性質進行研究和比較,全麵展現瞭免疫毒素髮揮生物學功能的過程及各箇生物作用過程之間的相互影響,為詳儘的機製研究和免疫毒素的進一步優化改造提供瞭重要的依據.
위료연구면역독소발휘생물학작용적전과정,구건료량충불동형식적기우가단포균외독소(Pseudomonas exotoxin A,PE)적항암배항원(carcinoembryonic antigen, CEA)면역독소CEA(Fv)/PE38/KDEL화PE35/CEA(Fv)/KDEL.용류식세포술경간접면역형광법측정면역독소적항원결합활성.면역독소적내화(internalization)통과간접면역형광표기적방법재격광공취초현미경하진행검측,채용류식세포술진행면역독소내화적정량분석.세포조망채용FITC-annexin V/PI쌍형광염색방법진행분석.용새서람(MTT)법측정면역독소적파세포살상공능.대량충형식적면역독소재각개공능계단적성질진행연구화비교,전면전현료면역독소발휘생물학공능적과정급각개생물작용과정지간적상호영향,위상진적궤제연구화면역독소적진일보우화개조제공료중요적의거.
