甘肃医药
甘肅醫藥
감숙의약
Gansu Medical Journal
2010年
6期
601-605
,共5页
肺癌%基因芯片%Rb2/p130基因%点突变
肺癌%基因芯片%Rb2/p130基因%點突變
폐암%기인심편%Rb2/p130기인%점돌변
目的:用基因芯片方法检测肺癌标本中Rb2/p130基因的点突变情况,为肺癌诊断探索快速、准确的基因检测途径.方法:收集肺癌患者的手术标本,提取基因组DNA,检索Rb2/p130基因的DNA序列后,设计并合成探针和引物序列,将探针按一定顺序点样于醛基化玻片,制备成基因芯片.用荧光标记引物对肺癌标本DNA进行PCR扩增,扩增产物与基因芯片杂交,通过对杂交信号的检测判断是否发生热点突变,并用测序方法对突变位点进行验证.结果:在30例用寡核苷酸基因芯片的方法检测的肺癌标本中,Rb2/p 130基因突变的检出率为16.67％,其中肺腺癌的突变率为20％( 4/20),肺鳞癌的突变率16.67％(1/6);在检测过程中发现PCR产物浓度和杂交温度是影响结果的关键因素,对突变位点的测序证实了基因芯片的结果.结论:基因芯片法检测出中国人肺癌组织标本存在Rb2/p130基因突变,但突变率(16.67％)低于西方人(78.5％).未能检测全部突变位点、标本量小和人种差异可能是低突变率的原因.
目的:用基因芯片方法檢測肺癌標本中Rb2/p130基因的點突變情況,為肺癌診斷探索快速、準確的基因檢測途徑.方法:收集肺癌患者的手術標本,提取基因組DNA,檢索Rb2/p130基因的DNA序列後,設計併閤成探針和引物序列,將探針按一定順序點樣于醛基化玻片,製備成基因芯片.用熒光標記引物對肺癌標本DNA進行PCR擴增,擴增產物與基因芯片雜交,通過對雜交信號的檢測判斷是否髮生熱點突變,併用測序方法對突變位點進行驗證.結果:在30例用寡覈苷痠基因芯片的方法檢測的肺癌標本中,Rb2/p 130基因突變的檢齣率為16.67％,其中肺腺癌的突變率為20％( 4/20),肺鱗癌的突變率16.67％(1/6);在檢測過程中髮現PCR產物濃度和雜交溫度是影響結果的關鍵因素,對突變位點的測序證實瞭基因芯片的結果.結論:基因芯片法檢測齣中國人肺癌組織標本存在Rb2/p130基因突變,但突變率(16.67％)低于西方人(78.5％).未能檢測全部突變位點、標本量小和人種差異可能是低突變率的原因.
목적:용기인심편방법검측폐암표본중Rb2/p130기인적점돌변정황,위폐암진단탐색쾌속、준학적기인검측도경.방법:수집폐암환자적수술표본,제취기인조DNA,검색Rb2/p130기인적DNA서렬후,설계병합성탐침화인물서렬,장탐침안일정순서점양우철기화파편,제비성기인심편.용형광표기인물대폐암표본DNA진행PCR확증,확증산물여기인심편잡교,통과대잡교신호적검측판단시부발생열점돌변,병용측서방법대돌변위점진행험증.결과:재30례용과핵감산기인심편적방법검측적폐암표본중,Rb2/p 130기인돌변적검출솔위16.67％,기중폐선암적돌변솔위20％( 4/20),폐린암적돌변솔16.67％(1/6);재검측과정중발현PCR산물농도화잡교온도시영향결과적관건인소,대돌변위점적측서증실료기인심편적결과.결론:기인심편법검측출중국인폐암조직표본존재Rb2/p130기인돌변,단돌변솔(16.67％)저우서방인(78.5％).미능검측전부돌변위점、표본량소화인충차이가능시저돌변솔적원인.
