林业科学
林業科學
임업과학
SCIENTIA SILVAE SINICAE
2012年
5期
72-77
,共6页
杨树溃疡病%多重PCR%病原鉴定%环境样本
楊樹潰瘍病%多重PCR%病原鑒定%環境樣本
양수궤양병%다중PCR%병원감정%배경양본
利用真菌通用引物ITS1/ITS4,EF1-728F/EF1-986R对4种杨树溃疡病病原菌株和环境样本的核糖体DNA内部转录间隔区ITS序列和转录延伸因子EF - 1α基因序列分别进行普通和多重PCR检测,再进行测序比对分析.结果表明:退火温度为55.6℃,各引物终浓度为0.2μmol·L-1,可以成功地扩增出菌株和环境样本的目的条带,并通过测序比对鉴定出多种来自培养和环境病害组织中的溃疡病病菌,多重PCR能够检测到1ng的基因组DNA.研究结果将为建立溃疡病病原多重PCR鉴定技术和以环境溃疡病病害样本为直接检测鉴定对象的高通量的基因芯片检测方法奠定基础.
利用真菌通用引物ITS1/ITS4,EF1-728F/EF1-986R對4種楊樹潰瘍病病原菌株和環境樣本的覈糖體DNA內部轉錄間隔區ITS序列和轉錄延伸因子EF - 1α基因序列分彆進行普通和多重PCR檢測,再進行測序比對分析.結果錶明:退火溫度為55.6℃,各引物終濃度為0.2μmol·L-1,可以成功地擴增齣菌株和環境樣本的目的條帶,併通過測序比對鑒定齣多種來自培養和環境病害組織中的潰瘍病病菌,多重PCR能夠檢測到1ng的基因組DNA.研究結果將為建立潰瘍病病原多重PCR鑒定技術和以環境潰瘍病病害樣本為直接檢測鑒定對象的高通量的基因芯片檢測方法奠定基礎.
이용진균통용인물ITS1/ITS4,EF1-728F/EF1-986R대4충양수궤양병병원균주화배경양본적핵당체DNA내부전록간격구ITS서렬화전록연신인자EF - 1α기인서렬분별진행보통화다중PCR검측,재진행측서비대분석.결과표명:퇴화온도위55.6℃,각인물종농도위0.2μmol·L-1,가이성공지확증출균주화배경양본적목적조대,병통과측서비대감정출다충래자배양화배경병해조직중적궤양병병균,다중PCR능구검측도1ng적기인조DNA.연구결과장위건립궤양병병원다중PCR감정기술화이배경궤양병병해양본위직접검측감정대상적고통량적기인심편검측방법전정기출.
