武汉大学学报（医学版）
武漢大學學報（醫學版）
무한대학학보（의학판）
MEDICAL JOURNAL WUHAN UNIVERSITY
2007年
4期
529-531
,共3页
黎炜英%赵友云%高应林%王春香%乐惠荣
黎煒英%趙友雲%高應林%王春香%樂惠榮
려위영%조우운%고응림%왕춘향%악혜영
SYBR Green Ⅰ%TaqMan探针%定量PCR%HBV-DNA
SYBR Green Ⅰ%TaqMan探針%定量PCR%HBV-DNA
SYBR Green Ⅰ%TaqMan탐침%정량PCR%HBV-DNA
目的:探索SYBR Green Ⅰ和TaqMan探针双标记荧光定量PCR(dFQ-PCR)检测乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)的意义.方法:选择浓度为1011.70, 108.70, 106.70和＜1×106.00copies/L的4种血清各1份,进行dFQ-PCR,同时以TaqMan探针和SYBR Green Ⅰ单荧光标记PCR(sFQ-PCR)为对照,设置同一扩增和熔解曲线的循环参数,检测HBV-DNA含量及其熔解温度(Tm),每种方法一次检测每份血清5次.结果:dFQ-PCR检测的HBV-DNA阳性血的平均含量为1011.55±0.32,108.79±0.29,106.81±0.30,与TaqMan探针sFQ-PCR的1011.49±0.31,108.69±0.30,106.72±0.25 copies/L对应浓度值取10对数比较,无统计学意义(t=0.31, 0.54和0.27,均为P＞0.05);与SYBR Green Ⅰ染料sFQ-PCR的1011.41±0.35,108.21±0.34和106.26±0.26 copies/L(不含未检出的两次血清)比较,中低浓度有统计学意义(t=2.90和2.62,P＜0.05).dFQ-PCR和SYBR Green Ⅰ染料sFQ-PCR均出现明显熔解曲线,HBV-DNA含量为1011.70, 108.70和106.70 copies/L的Tm分别为79.8,71.8和72 ℃.结论:dFQ-PCR能同时检测HBV-DNA含量和Tm,为HBV含量及其基因分型的同步检测提供了新思路.
目的:探索SYBR Green Ⅰ和TaqMan探針雙標記熒光定量PCR(dFQ-PCR)檢測乙型肝炎病毒覈痠(HBV-DNA)的意義.方法:選擇濃度為1011.70, 108.70, 106.70和＜1×106.00copies/L的4種血清各1份,進行dFQ-PCR,同時以TaqMan探針和SYBR Green Ⅰ單熒光標記PCR(sFQ-PCR)為對照,設置同一擴增和鎔解麯線的循環參數,檢測HBV-DNA含量及其鎔解溫度(Tm),每種方法一次檢測每份血清5次.結果:dFQ-PCR檢測的HBV-DNA暘性血的平均含量為1011.55±0.32,108.79±0.29,106.81±0.30,與TaqMan探針sFQ-PCR的1011.49±0.31,108.69±0.30,106.72±0.25 copies/L對應濃度值取10對數比較,無統計學意義(t=0.31, 0.54和0.27,均為P＞0.05);與SYBR Green Ⅰ染料sFQ-PCR的1011.41±0.35,108.21±0.34和106.26±0.26 copies/L(不含未檢齣的兩次血清)比較,中低濃度有統計學意義(t=2.90和2.62,P＜0.05).dFQ-PCR和SYBR Green Ⅰ染料sFQ-PCR均齣現明顯鎔解麯線,HBV-DNA含量為1011.70, 108.70和106.70 copies/L的Tm分彆為79.8,71.8和72 ℃.結論:dFQ-PCR能同時檢測HBV-DNA含量和Tm,為HBV含量及其基因分型的同步檢測提供瞭新思路.
목적:탐색SYBR Green Ⅰ화TaqMan탐침쌍표기형광정량PCR(dFQ-PCR)검측을형간염병독핵산(HBV-DNA)적의의.방법:선택농도위1011.70, 108.70, 106.70화＜1×106.00copies/L적4충혈청각1빈,진행dFQ-PCR,동시이TaqMan탐침화SYBR Green Ⅰ단형광표기PCR(sFQ-PCR)위대조,설치동일확증화용해곡선적순배삼수,검측HBV-DNA함량급기용해온도(Tm),매충방법일차검측매빈혈청5차.결과:dFQ-PCR검측적HBV-DNA양성혈적평균함량위1011.55±0.32,108.79±0.29,106.81±0.30,여TaqMan탐침sFQ-PCR적1011.49±0.31,108.69±0.30,106.72±0.25 copies/L대응농도치취10대수비교,무통계학의의(t=0.31, 0.54화0.27,균위P＞0.05);여SYBR Green Ⅰ염료sFQ-PCR적1011.41±0.35,108.21±0.34화106.26±0.26 copies/L(불함미검출적량차혈청)비교,중저농도유통계학의의(t=2.90화2.62,P＜0.05).dFQ-PCR화SYBR Green Ⅰ염료sFQ-PCR균출현명현용해곡선,HBV-DNA함량위1011.70, 108.70화106.70 copies/L적Tm분별위79.8,71.8화72 ℃.결론:dFQ-PCR능동시검측HBV-DNA함량화Tm,위HBV함량급기기인분형적동보검측제공료신사로.
