CAJ | 학술논문

背景:目前,制备DNA 分子量标准的方法主要有2 种,一种是用限制性内切酶消化某种DNA,另一种是利用PCR 扩增,2 种方法各有优缺点.在前期采用PCR 技术在前期扩增100～500 bp 片段的基础上,实验室又成功扩增出600～1 000 bp片段,PCR 产物经过纯化,混匀,制备的DNA Ladder,结果制备DNA Ladder 的条带清晰,易于识别,可完全与公司商品化的DNA Ladder 相比,完全可用于分子生物学实验.目的:利用PCR 扩增技术制备DNA 分子量标准参照物.方法:自行构建了一种特殊适宜扩增的质粒pUC-DNA,根据pUC-DNA 的基因序列,利用primer5.0 设计能特异扩增100～1 000 bp 的PCR 引物.PCR 扩增出100～1 000 bp 大小的DNA 片段,在2%琼脂糖凝胶中电泳观察结果.用凝胶回收试剂盒回收目的PCR 产物,测序结果与pUC-DNA 上基因序列进行序列比对,Blast 进行同源性分析.将PCR 产物用酚/氯仿抽提,乙醇沉淀,按比例混匀,即可使用.结果与结论:利用PCR 技术能够成功扩增出100～1 000 bp 条带,片段大小与预期结果相符,片段序列与GenBank 序列完全一致,利用回收片段制备的DNA Ladder 条带清晰,可与同类产品相比.
배경:목전,제비DNA 분자량표준적방법주요유2 충,일충시용한제성내절매소화모충DNA,령일충시이용PCR 확증,2 충방법각유우결점.재전기채용PCR 기술재전기확증100～500 bp 편단적기출상,실험실우성공확증출600～1 000 bp편단,PCR 산물경과순화,혼균,제비적DNA Ladder,결과제비DNA Ladder 적조대청석,역우식별,가완전여공사상품화적DNA Ladder 상비,완전가용우분자생물학실험.목적:이용PCR 확증기술제비DNA 분자량표준삼조물.방법:자행구건료일충특수괄의확증적질립pUC-DNA,근거pUC-DNA 적기인서렬,이용primer5.0 설계능특이확증100～1 000 bp 적PCR 인물.PCR 확증출100～1 000 bp 대소적DNA 편단,재2%경지당응효중전영관찰결과.용응효회수시제합회수목적PCR 산물,측서결과여pUC-DNA 상기인서렬진행서렬비대,Blast 진행동원성분석.장PCR 산물용분/록방추제,을순침정,안비례혼균,즉가사용.결과여결론:이용PCR 기술능구성공확증출100～1 000 bp 조대,편단대소여예기결과상부,편단서렬여GenBank 서렬완전일치,이용회수편단제비적DNA Ladder 조대청석,가여동류산품상비.