湖南农业科学
湖南農業科學
호남농업과학
HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
7期
126-129
,共4页
郭少娟%张中旺%张永光%王永录%潘丽%吕建亮%周鹏
郭少娟%張中旺%張永光%王永錄%潘麗%呂建亮%週鵬
곽소연%장중왕%장영광%왕영록%반려%려건량%주붕
口蹄疫病毒%结构蛋白P1%多克隆抗体
口蹄疫病毒%結構蛋白P1%多剋隆抗體
구제역병독%결구단백P1%다극륭항체
口蹄疫病毒接种乳鼠、豚鼠及BHK-21细胞,获得相应的适应毒.以各组织液中的口蹄疫病毒RNA为模板,反转录并扩增VP1基因,PCR产物琼脂糖凝胶电泳,回收目的片段,测序.测序结果与核酸数据库中口蹄疫病毒VP1基因比对,并将各适应毒扩增的VP1基因序列相互比对.结果表明:此毒为口蹄疫病毒,各适应毒间序列同源性达98％.并用口蹄疫病毒抗原进行SDSPAGE,分别与大肠杆菌表达的口蹄疫病毒HeB株P1蛋白制备的多克隆兔抗及健康对照血清进行Western blot,对多克隆兔抗进行鉴定,并用间接ELISA测定此多克隆兔抗的效价.确定此多抗能中和FMDV结构蛋白,抗体效价＞1∶800.
口蹄疫病毒接種乳鼠、豚鼠及BHK-21細胞,穫得相應的適應毒.以各組織液中的口蹄疫病毒RNA為模闆,反轉錄併擴增VP1基因,PCR產物瓊脂糖凝膠電泳,迴收目的片段,測序.測序結果與覈痠數據庫中口蹄疫病毒VP1基因比對,併將各適應毒擴增的VP1基因序列相互比對.結果錶明:此毒為口蹄疫病毒,各適應毒間序列同源性達98％.併用口蹄疫病毒抗原進行SDSPAGE,分彆與大腸桿菌錶達的口蹄疫病毒HeB株P1蛋白製備的多剋隆兔抗及健康對照血清進行Western blot,對多剋隆兔抗進行鑒定,併用間接ELISA測定此多剋隆兔抗的效價.確定此多抗能中和FMDV結構蛋白,抗體效價＞1∶800.
구제역병독접충유서、돈서급BHK-21세포,획득상응적괄응독.이각조직액중적구제역병독RNA위모판,반전록병확증VP1기인,PCR산물경지당응효전영,회수목적편단,측서.측서결과여핵산수거고중구제역병독VP1기인비대,병장각괄응독확증적VP1기인서렬상호비대.결과표명:차독위구제역병독,각괄응독간서렬동원성체98％.병용구제역병독항원진행SDSPAGE,분별여대장간균표체적구제역병독HeB주P1단백제비적다극륭토항급건강대조혈청진행Western blot,대다극륭토항진행감정,병용간접ELISA측정차다극륭토항적효개.학정차다항능중화FMDV결구단백,항체효개＞1∶800.
