肿瘤预防与治疗
腫瘤預防與治療
종류예방여치료
JOURNAL OF CANCER CONTROL AND TREATMENT
2012年
4期
210-214
,共5页
李状%王琪%张玮%阳志军%唐步坚%李力
李狀%王琪%張瑋%暘誌軍%唐步堅%李力
리상%왕기%장위%양지군%당보견%리력
RNA干扰%二氢叶酸还原酶(DHFR)%pGPU6
RNA榦擾%二氫葉痠還原酶(DHFR)%pGPU6
RNA간우%이경협산환원매(DHFR)%pGPU6
目的:构建二氢叶酸还原酶(dyhidrofolate reductase,DHFR)基因RNA干扰质粒载体,为探讨抑制DHFR基因表达在卵巢癌铂类耐药治疗中的意义奠定基础.方法:设计DHFR基因靶向的发夹状siRNA,筛选出最佳siRNA沉默片段,退火后连接入pGPU6/GFP/Neo载体,转化后进行序列鉴定,脂质体转染SKOV3细胞株,并进行荧光摄像.结果:将退火后的双链寡核苷酸片段连接到pGPU6/GFP/Neo载体,测序结果正确.转染SKOV3细胞后,PCR鉴定干扰效果,G418筛选稳定细胞株.结论:成功构建针对DHFR基因的siRNA载体,找到了有效的干扰靶序列,转染SKOV3细胞后,DHFR基因的表达明显减弱.
目的:構建二氫葉痠還原酶(dyhidrofolate reductase,DHFR)基因RNA榦擾質粒載體,為探討抑製DHFR基因錶達在卵巢癌鉑類耐藥治療中的意義奠定基礎.方法:設計DHFR基因靶嚮的髮夾狀siRNA,篩選齣最佳siRNA沉默片段,退火後連接入pGPU6/GFP/Neo載體,轉化後進行序列鑒定,脂質體轉染SKOV3細胞株,併進行熒光攝像.結果:將退火後的雙鏈寡覈苷痠片段連接到pGPU6/GFP/Neo載體,測序結果正確.轉染SKOV3細胞後,PCR鑒定榦擾效果,G418篩選穩定細胞株.結論:成功構建針對DHFR基因的siRNA載體,找到瞭有效的榦擾靶序列,轉染SKOV3細胞後,DHFR基因的錶達明顯減弱.
목적:구건이경협산환원매(dyhidrofolate reductase,DHFR)기인RNA간우질립재체,위탐토억제DHFR기인표체재란소암박류내약치료중적의의전정기출.방법:설계DHFR기인파향적발협상siRNA,사선출최가siRNA침묵편단,퇴화후련접입pGPU6/GFP/Neo재체,전화후진행서렬감정,지질체전염SKOV3세포주,병진행형광섭상.결과:장퇴화후적쌍련과핵감산편단련접도pGPU6/GFP/Neo재체,측서결과정학.전염SKOV3세포후,PCR감정간우효과,G418사선은정세포주.결론:성공구건침대DHFR기인적siRNA재체,조도료유효적간우파서렬,전염SKOV3세포후,DHFR기인적표체명현감약.
