中国医药导报
中國醫藥導報
중국의약도보
CHINA MEDICAL HERALD
2012年
27期
10-12
,共3页
楚广民%张建波%陈小兵%刘红亮
楚廣民%張建波%陳小兵%劉紅亮
초엄민%장건파%진소병%류홍량
鸟氨酸脱羧酶%基因沉默%子宫内膜癌%Ishikawa
鳥氨痠脫羧酶%基因沉默%子宮內膜癌%Ishikawa
조안산탈최매%기인침묵%자궁내막암%Ishikawa
目的 利用RNA干扰技术,观察鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)基因在子宫内膜癌Ishikawa细胞的沉默效应及对Ishikawa细胞增殖周期的影响.方法 设计合成以鸟氨酸脱羧酶基因为靶向目标的siRNA序列质粒,利用脂质体介导的方法 将质粒转染至子宫内膜癌Ishikawa细胞,实验分三组:Ishikawa组,pSUPER-EGFP组,pSUPER-EGFP-ODC组.用Real-time PCR和Western blot检测ODC的表达情况.采用MTT和流式细胞术来检测ODC基因沉默对Ishikawa细胞生长的影响.结果 Real-time PCR和Western显示pSUPER-EGFP-ODC组细胞ODC mRNA和蛋白质表达水平明显下降.MTT示pSUPER-EGFP-ODC能显著抑制Ishikawa细胞的增殖活性,与Ishikawa相比,差异有高度统计学意义(P < 0.01).流式细胞术结果 示pSUPER-EGFP-ODC能显著阻滞Ishikawa细胞于G0/G1期,S期细胞数相应减少,并诱导细胞凋亡,与Ishikawa相比,差异有高度统计学意义(P < 0.01).结论 转染靶向ODC基因的siRNA序列质粒能够下调ODC基因的表达,抑制人子宫内膜癌细胞Ishikawa在体外的增殖,阻滞Ishikawa细胞于G0/G1期并诱导细胞凋亡.
目的 利用RNA榦擾技術,觀察鳥氨痠脫羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)基因在子宮內膜癌Ishikawa細胞的沉默效應及對Ishikawa細胞增殖週期的影響.方法 設計閤成以鳥氨痠脫羧酶基因為靶嚮目標的siRNA序列質粒,利用脂質體介導的方法 將質粒轉染至子宮內膜癌Ishikawa細胞,實驗分三組:Ishikawa組,pSUPER-EGFP組,pSUPER-EGFP-ODC組.用Real-time PCR和Western blot檢測ODC的錶達情況.採用MTT和流式細胞術來檢測ODC基因沉默對Ishikawa細胞生長的影響.結果 Real-time PCR和Western顯示pSUPER-EGFP-ODC組細胞ODC mRNA和蛋白質錶達水平明顯下降.MTT示pSUPER-EGFP-ODC能顯著抑製Ishikawa細胞的增殖活性,與Ishikawa相比,差異有高度統計學意義(P < 0.01).流式細胞術結果 示pSUPER-EGFP-ODC能顯著阻滯Ishikawa細胞于G0/G1期,S期細胞數相應減少,併誘導細胞凋亡,與Ishikawa相比,差異有高度統計學意義(P < 0.01).結論 轉染靶嚮ODC基因的siRNA序列質粒能夠下調ODC基因的錶達,抑製人子宮內膜癌細胞Ishikawa在體外的增殖,阻滯Ishikawa細胞于G0/G1期併誘導細胞凋亡.
목적 이용RNA간우기술,관찰조안산탈최매(ornithine decarboxylase,ODC)기인재자궁내막암Ishikawa세포적침묵효응급대Ishikawa세포증식주기적영향.방법 설계합성이조안산탈최매기인위파향목표적siRNA서렬질립,이용지질체개도적방법 장질립전염지자궁내막암Ishikawa세포,실험분삼조:Ishikawa조,pSUPER-EGFP조,pSUPER-EGFP-ODC조.용Real-time PCR화Western blot검측ODC적표체정황.채용MTT화류식세포술래검측ODC기인침묵대Ishikawa세포생장적영향.결과 Real-time PCR화Western현시pSUPER-EGFP-ODC조세포ODC mRNA화단백질표체수평명현하강.MTT시pSUPER-EGFP-ODC능현저억제Ishikawa세포적증식활성,여Ishikawa상비,차이유고도통계학의의(P < 0.01).류식세포술결과 시pSUPER-EGFP-ODC능현저조체Ishikawa세포우G0/G1기,S기세포수상응감소,병유도세포조망,여Ishikawa상비,차이유고도통계학의의(P < 0.01).결론 전염파향ODC기인적siRNA서렬질립능구하조ODC기인적표체,억제인자궁내막암세포Ishikawa재체외적증식,조체Ishikawa세포우G0/G1기병유도세포조망.
