CAJ | 학술논문

背景与目的:有研究表明野生型p53可以诱导RGS16表达,而RGS16可能与胶质瘤的发生有关.本研究旨在探讨RGS16基因转染对大鼠胶质瘤C6细胞生长的影响.方法:构建真核表达载体pIRES2-EGFP-RGS16,脂质体法转染C6细胞,经G418筛选后荧光显微镜观察细胞中增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluors cent protein,EGFP)的表达,RT-PCR证实RGS16的mRNA表达,免疫细胞化学方法检测细胞中RGS16蛋白表达.最后利用流式细胞仪、生长曲线、平板克隆形成等方法研究RGS16基因对胶质瘤细胞周期、生长及增殖的影响.结果:成功构建了稳定表达RGS16和表达空载体的细胞系C6-RGS16、C6-GFP.C6-RGS16、C6-GFP和C6经流式细胞仪检测S期的细胞比例分别为28.5%、18.9%和14.3%(P＜0.05);生长曲线表明C6-RGS16生长的速度明显快于C6-GFP及C6,但其平板克隆形成率分别为12%、25%和25%(P＜0.05).结论:RGS16促进C6细胞周期从G1期向S期过渡,加快细胞生长速度,但是并不促进细胞克隆形成.
배경여목적:유연구표명야생형p53가이유도RGS16표체,이RGS16가능여효질류적발생유관.본연구지재탐토RGS16기인전염대대서효질류C6세포생장적영향.방법:구건진핵표체재체pIRES2-EGFP-RGS16,지질체법전염C6세포,경G418사선후형광현미경관찰세포중증강형록색형광단백(enhanced green fluors cent protein,EGFP)적표체,RT-PCR증실RGS16적mRNA표체,면역세포화학방법검측세포중RGS16단백표체.최후이용류식세포의、생장곡선、평판극륭형성등방법연구RGS16기인대효질류세포주기、생장급증식적영향.결과:성공구건료은정표체RGS16화표체공재체적세포계C6-RGS16、C6-GFP.C6-RGS16、C6-GFP화C6경류식세포의검측S기적세포비례분별위28.5%、18.9%화14.3%(P＜0.05);생장곡선표명C6-RGS16생장적속도명현쾌우C6-GFP급C6,단기평판극륭형성솔분별위12%、25%화25%(P＜0.05).결론:RGS16촉진C6세포주기종G1기향S기과도,가쾌세포생장속도,단시병불촉진세포극륭형성.