农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2006年
3期
423-428
,共6页
陈继峰%李颖%姜伟%王珍芳%孙建波%李健%李季伦%李绍华
陳繼峰%李穎%薑偉%王珍芳%孫建波%李健%李季倫%李紹華
진계봉%리영%강위%왕진방%손건파%리건%리계륜%리소화
细菌磁小体%羊抗兔抗体%结合条件%抗体连接效率
細菌磁小體%羊抗兔抗體%結閤條件%抗體連接效率
세균자소체%양항토항체%결합조건%항체련접효솔
用羊抗兔抗体进行抗体连接到细菌磁小体(BMPs)实验,以探讨结合条件对抗体连接效率(以每毫克BMPs上连接抗体的微克数表示,单位为μg/mg)的影响.实验表明,冷冻干燥后的BMPs的抗体连接效率降低36%～55%;在液氮中(-196℃)预处理的抗体连接效率显著高于在-70℃和-20℃预处理的.室温(15℃)下反应18 h的抗体连接效率最高,为64.06μg/mg,明显高于其它温度和连接时间的.反应体系中,BMPs用量由5 mg降到0.1 mg,抗体用量由10μg增加到300μg时,抗体连接效率逐渐上升,当BMPs用量为0.1 mg,抗体用量为300μg时,抗体连接效率达762.37 μg/mg.PBS、HEPES、Tris-HCl、MOPS、VBS以及磷酸盐等溶液可用于抗体连接到BMPs体系中,在通常使用的缓冲液pH和浓度下,几种溶液的抗体连接效率变化范围为46.28±0.58～90.83±1.64μg/mg;并且不同的溶液有相应的使抗体连接效率达到最高时的pH和溶液浓度,当HEPES的pH为3.5,浓度为20 mmol/L;Na3PO4的pH为5.6,浓度为5 mmol/L时,抗体连接效率分别为108.01和76.78μg/mg.对连接到BMPs上的抗体进行SDS-PAGE定性检测结果表明,抗体连接到了BMPs的膜上.
用羊抗兔抗體進行抗體連接到細菌磁小體(BMPs)實驗,以探討結閤條件對抗體連接效率(以每毫剋BMPs上連接抗體的微剋數錶示,單位為μg/mg)的影響.實驗錶明,冷凍榦燥後的BMPs的抗體連接效率降低36%～55%;在液氮中(-196℃)預處理的抗體連接效率顯著高于在-70℃和-20℃預處理的.室溫(15℃)下反應18 h的抗體連接效率最高,為64.06μg/mg,明顯高于其它溫度和連接時間的.反應體繫中,BMPs用量由5 mg降到0.1 mg,抗體用量由10μg增加到300μg時,抗體連接效率逐漸上升,噹BMPs用量為0.1 mg,抗體用量為300μg時,抗體連接效率達762.37 μg/mg.PBS、HEPES、Tris-HCl、MOPS、VBS以及燐痠鹽等溶液可用于抗體連接到BMPs體繫中,在通常使用的緩遲液pH和濃度下,幾種溶液的抗體連接效率變化範圍為46.28±0.58～90.83±1.64μg/mg;併且不同的溶液有相應的使抗體連接效率達到最高時的pH和溶液濃度,噹HEPES的pH為3.5,濃度為20 mmol/L;Na3PO4的pH為5.6,濃度為5 mmol/L時,抗體連接效率分彆為108.01和76.78μg/mg.對連接到BMPs上的抗體進行SDS-PAGE定性檢測結果錶明,抗體連接到瞭BMPs的膜上.
용양항토항체진행항체련접도세균자소체(BMPs)실험,이탐토결합조건대항체련접효솔(이매호극BMPs상련접항체적미극수표시,단위위μg/mg)적영향.실험표명,냉동간조후적BMPs적항체련접효솔강저36%～55%;재액담중(-196℃)예처리적항체련접효솔현저고우재-70℃화-20℃예처리적.실온(15℃)하반응18 h적항체련접효솔최고,위64.06μg/mg,명현고우기타온도화련접시간적.반응체계중,BMPs용량유5 mg강도0.1 mg,항체용량유10μg증가도300μg시,항체련접효솔축점상승,당BMPs용량위0.1 mg,항체용량위300μg시,항체련접효솔체762.37 μg/mg.PBS、HEPES、Tris-HCl、MOPS、VBS이급린산염등용액가용우항체련접도BMPs체계중,재통상사용적완충액pH화농도하,궤충용액적항체련접효솔변화범위위46.28±0.58～90.83±1.64μg/mg;병차불동적용액유상응적사항체련접효솔체도최고시적pH화용액농도,당HEPES적pH위3.5,농도위20 mmol/L;Na3PO4적pH위5.6,농도위5 mmol/L시,항체련접효솔분별위108.01화76.78μg/mg.대련접도BMPs상적항체진행SDS-PAGE정성검측결과표명,항체련접도료BMPs적막상.
