同济大学学报（医学版）
同濟大學學報（醫學版）
동제대학학보（의학판）
JOURNAL OF TONGJI UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2006年
4期
27-31,39
,共6页
俞冬熠%张全启%齐洁%田茂鑫
俞鼕熠%張全啟%齊潔%田茂鑫
유동습%장전계%제길%전무흠
B细胞表面原抗体%酷氨酸磷酸酶%B淋巴细胞%细胞凋亡
B細胞錶麵原抗體%酷氨痠燐痠酶%B淋巴細胞%細胞凋亡
B세포표면원항체%혹안산린산매%B림파세포%세포조망
目的 研究血细胞专有的酪氨酸磷酸酶(hematopoietic protein tyrosine phosphatase,HePTP)在B细胞凋亡研究模型[B细胞表面抗原受体(B-cell antigen receptor,BCR)诱导的WEHI231细胞的凋亡]中的作用及机制.方法 HePTP是BCR诱导WEHI231细胞发生凋亡的信号传导通路中ERK和p38激酶的调节因子.应用PCR定点突变的方法,构建起含有功能性突变的HePTP基因的逆转录病毒载体.将野生型与突变型质粒转染BOSC23细胞,收集病毒上清,感染WEHI231细胞后,加入anti-IgM诱导凋亡,流式细胞仪检测被感染细胞的凋亡情况.western印迹检测野生型及突变型HePTP的表达及作用.结果 野生型HePTP基因的过量表达抑制WEHI231细胞的凋亡,而失去与底物作用位点及催化域失活的突变型基因的过量表达则均没有抑制凋亡的作用.结论 HePTP抑制BCR诱导的未成熟B淋巴细胞的凋亡,与MAPK底物结合,并同时使其磷酸化的水平发生变化,是HePTP发挥抗凋亡作用的两个必要条件.
目的 研究血細胞專有的酪氨痠燐痠酶(hematopoietic protein tyrosine phosphatase,HePTP)在B細胞凋亡研究模型[B細胞錶麵抗原受體(B-cell antigen receptor,BCR)誘導的WEHI231細胞的凋亡]中的作用及機製.方法 HePTP是BCR誘導WEHI231細胞髮生凋亡的信號傳導通路中ERK和p38激酶的調節因子.應用PCR定點突變的方法,構建起含有功能性突變的HePTP基因的逆轉錄病毒載體.將野生型與突變型質粒轉染BOSC23細胞,收集病毒上清,感染WEHI231細胞後,加入anti-IgM誘導凋亡,流式細胞儀檢測被感染細胞的凋亡情況.western印跡檢測野生型及突變型HePTP的錶達及作用.結果 野生型HePTP基因的過量錶達抑製WEHI231細胞的凋亡,而失去與底物作用位點及催化域失活的突變型基因的過量錶達則均沒有抑製凋亡的作用.結論 HePTP抑製BCR誘導的未成熟B淋巴細胞的凋亡,與MAPK底物結閤,併同時使其燐痠化的水平髮生變化,是HePTP髮揮抗凋亡作用的兩箇必要條件.
목적 연구혈세포전유적락안산린산매(hematopoietic protein tyrosine phosphatase,HePTP)재B세포조망연구모형[B세포표면항원수체(B-cell antigen receptor,BCR)유도적WEHI231세포적조망]중적작용급궤제.방법 HePTP시BCR유도WEHI231세포발생조망적신호전도통로중ERK화p38격매적조절인자.응용PCR정점돌변적방법,구건기함유공능성돌변적HePTP기인적역전록병독재체.장야생형여돌변형질립전염BOSC23세포,수집병독상청,감염WEHI231세포후,가입anti-IgM유도조망,류식세포의검측피감염세포적조망정황.western인적검측야생형급돌변형HePTP적표체급작용.결과 야생형HePTP기인적과량표체억제WEHI231세포적조망,이실거여저물작용위점급최화역실활적돌변형기인적과량표체칙균몰유억제조망적작용.결론 HePTP억제BCR유도적미성숙B림파세포적조망,여MAPK저물결합,병동시사기린산화적수평발생변화,시HePTP발휘항조망작용적량개필요조건.
