华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2006年
4期
86-89
,共4页
鸡γ-干扰素%克隆%序列分析
鷄γ-榦擾素%剋隆%序列分析
계γ-간우소%극륭%서렬분석
为了研究鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因的功能并进一步探究其在控制家禽传染病方面的应用,根据GenBank已发表的ChIFN-γ cDNA基因序列自行设计引物,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激培养鸡脾淋巴细胞中提取的总RNA中扩增得到ChIFN-γ,然后连接到pMD18-T载体上并转化到Top10感受态细胞中,获得阳性重组质粒并进行正确性序列测序.核甘酸序列结果表明,试验得到了长为513 bp的ChIFN-γ基因,与原鸡(Gullus) IFN-γ的同源性可高达100%, 其含有1个495 bp的开放性阅读框架,编码164个氨基酸,推测其成熟蛋白的相对分子质量约为18 000.
為瞭研究鷄γ-榦擾素(ChIFN-γ)基因的功能併進一步探究其在控製傢禽傳染病方麵的應用,根據GenBank已髮錶的ChIFN-γ cDNA基因序列自行設計引物,應用反轉錄-聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)技術從伴刀豆毬蛋白A(ConA)刺激培養鷄脾淋巴細胞中提取的總RNA中擴增得到ChIFN-γ,然後連接到pMD18-T載體上併轉化到Top10感受態細胞中,穫得暘性重組質粒併進行正確性序列測序.覈甘痠序列結果錶明,試驗得到瞭長為513 bp的ChIFN-γ基因,與原鷄(Gullus) IFN-γ的同源性可高達100%, 其含有1箇495 bp的開放性閱讀框架,編碼164箇氨基痠,推測其成熟蛋白的相對分子質量約為18 000.
위료연구계γ-간우소(ChIFN-γ)기인적공능병진일보탐구기재공제가금전염병방면적응용,근거GenBank이발표적ChIFN-γ cDNA기인서렬자행설계인물,응용반전록-취합매련식반응(RT-PCR)기술종반도두구단백A(ConA)자격배양계비림파세포중제취적총RNA중확증득도ChIFN-γ,연후련접도pMD18-T재체상병전화도Top10감수태세포중,획득양성중조질립병진행정학성서렬측서.핵감산서렬결과표명,시험득도료장위513 bp적ChIFN-γ기인,여원계(Gullus) IFN-γ적동원성가고체100%, 기함유1개495 bp적개방성열독광가,편마164개안기산,추측기성숙단백적상대분자질량약위18 000.
