中华儿科杂志
中華兒科雜誌
중화인과잡지
Chinese Journal of Pediatrics
2003年
9期
692-696
,共5页
尚世强%董关萍%付君芬%洪文谰%杜立中%俞锡林
尚世彊%董關萍%付君芬%洪文讕%杜立中%俞錫林
상세강%동관평%부군분%홍문란%두립중%유석림
RNA,核糖体,16S%RNA,核糖体,23 S%基因,rRNA%聚合酶链反应%多态性,限制性片段长度%序列分析
RNA,覈糖體,16S%RNA,覈糖體,23 S%基因,rRNA%聚閤酶鏈反應%多態性,限製性片段長度%序列分析
RNA,핵당체,16S%RNA,핵당체,23 S%기인,rRNA%취합매련반응%다태성,한제성편단장도%서렬분석
目的应用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)及测序技术,建立检测不同属种细菌的 16S-23SrRNA基因区间的特异图谱.方法对临床上常见的细菌进行PCR扩增、RFLP、分子克隆及序列分析,同时对临床标本进行培养与PCR-RFLP比较.结果 27株不同细菌行PCR扩增后,得到不同DNA 图谱.其中15种细菌经PCR扩增即可区分,另10种经Hinf I或Alu I 酶切后才能区分.肺炎克雷伯菌与坚韧肠球菌的差异只在第779位碱基上不同,Xma III酶能区别.42例临床诊断为新生儿败血症者,15例培养阳性,阳性率35.7%;而PCR阳性者则为27例,阳性率为64.29%,明显高于血培养(P<0.01).6例脑脊液标本中,1例PCR及培养均阳性(表皮葡萄球菌);2例培养阴性标本,其PCR也阳性;经图谱分析为葡萄球菌,1例培养为新型隐球菌的脑脊液标本PCR检测为阴性.另2例PCR及培养均阴性.结论建立了PCR-RFLP技术快速检测细菌16S-23S rRNA基因区间的方法,具有特异、敏感、快速、准确的特点,为临床细菌感染的病原诊断提供新的科学依据.
目的應用聚閤酶鏈反應(PCR)、限製性內切酶片段長度多態性分析(RFLP)及測序技術,建立檢測不同屬種細菌的 16S-23SrRNA基因區間的特異圖譜.方法對臨床上常見的細菌進行PCR擴增、RFLP、分子剋隆及序列分析,同時對臨床標本進行培養與PCR-RFLP比較.結果 27株不同細菌行PCR擴增後,得到不同DNA 圖譜.其中15種細菌經PCR擴增即可區分,另10種經Hinf I或Alu I 酶切後纔能區分.肺炎剋雷伯菌與堅韌腸毬菌的差異隻在第779位堿基上不同,Xma III酶能區彆.42例臨床診斷為新生兒敗血癥者,15例培養暘性,暘性率35.7%;而PCR暘性者則為27例,暘性率為64.29%,明顯高于血培養(P<0.01).6例腦脊液標本中,1例PCR及培養均暘性(錶皮葡萄毬菌);2例培養陰性標本,其PCR也暘性;經圖譜分析為葡萄毬菌,1例培養為新型隱毬菌的腦脊液標本PCR檢測為陰性.另2例PCR及培養均陰性.結論建立瞭PCR-RFLP技術快速檢測細菌16S-23S rRNA基因區間的方法,具有特異、敏感、快速、準確的特點,為臨床細菌感染的病原診斷提供新的科學依據.
목적응용취합매련반응(PCR)、한제성내절매편단장도다태성분석(RFLP)급측서기술,건립검측불동속충세균적 16S-23SrRNA기인구간적특이도보.방법대림상상상견적세균진행PCR확증、RFLP、분자극륭급서렬분석,동시대림상표본진행배양여PCR-RFLP비교.결과 27주불동세균행PCR확증후,득도불동DNA 도보.기중15충세균경PCR확증즉가구분,령10충경Hinf I혹Alu I 매절후재능구분.폐염극뢰백균여견인장구균적차이지재제779위감기상불동,Xma III매능구별.42례림상진단위신생인패혈증자,15례배양양성,양성솔35.7%;이PCR양성자칙위27례,양성솔위64.29%,명현고우혈배양(P<0.01).6례뇌척액표본중,1례PCR급배양균양성(표피포도구균);2례배양음성표본,기PCR야양성;경도보분석위포도구균,1례배양위신형은구균적뇌척액표본PCR검측위음성.령2례PCR급배양균음성.결론건립료PCR-RFLP기술쾌속검측세균16S-23S rRNA기인구간적방법,구유특이、민감、쾌속、준학적특점,위림상세균감염적병원진단제공신적과학의거.
