CAJ | 학술논문

人骨髓间质干细胞中的端粒调控机制
인골수간질간세포중적단립조공궤제
Mechanism of telomere mainteance in human bone marrow mesenchymal stem cells

万方数据

中国病理生理杂志中國病理生理雜誌 중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2007年 9期 1737-1742 ,共6页

李静远%蓝建平%赵妍敏%来晓瑜%罗依%孙洁%余建%朱园园%曾芬芳%黄河

리정원%람건평%조연민%래효유%라의%손길%여건%주완완%증분방%황하

间质干细胞%端粒,末端转移酶%细胞周期間質榦細胞%耑粒,末耑轉移酶%細胞週期
간질간세포%단립,말단전이매%세포주기

目的:研究人骨髓来源间充质干细胞(MSCs)端粒长度的调控机制.方法:以贴壁培养法从人骨髓中分离MSCs并用MSCs及造血干细胞相关表面抗体作表型鉴定,用Southern blotting检测MSCs的端粒长度;应用免疫荧光染色技术检测端粒重复序列结合因子1(TRF1)和早幼粒细胞白血病蛋白小体(PML)的定位;以端粒重复序列扩增法(TRAP)和/或Western blotting法检测传代及分化成脂肪细胞的MSCs和经同步化处理被阻断在S期的MSCs的端粒酶表达.结果:与端粒酶阴性ALT细胞株WI-38-2RA细胞相比,MSCs的端粒长度较短并且端粒长度变异度不大;端粒调控相关蛋白TRF1和PML在MSCs中的定位则与端粒酶阳性细胞HeLa细胞相同,两者呈非共定位,而在端粒酶阴性WI-38-2RA细胞中两者呈共定位状态.MSCs中不存在有染色体外端粒重复序列DNA(ECTR DNA).TRAP法检测传代培养的MSCs端粒酶呈阴性表达,但分化成脂肪的MSCs端粒酶呈阳性表达.Western blotting 检测同步化处理前MSCs端粒酶呈微弱表达,经同步化处理被阻断在S期时,MSCs的端粒酶表达明显增高,并且与S期的细胞比例呈正相关.结论:MSCs中不存在ALT相关的早幼粒细胞白血病蛋白小体(APBs)、染色体外端粒重复序列DNA(ECTR DNA)和端粒长度较长、端粒长度变异度大等ALT机制相关分子特征;非同步化在S期处理的MSCs,端粒酶呈微弱表达,但诱导向脂肪细胞分化或处在S期时,MSCs的端粒酶表达明显增高,并且与S期的细胞比例呈正相关.本研究提示MSCs是通过端粒酶机制而不是端粒延长旁路途径(ALT)机制调控其端粒末端.
목적:연구인골수래원간충질간세포(MSCs)단립장도적조공궤제.방법:이첩벽배양법종인골수중분리MSCs병용MSCs급조혈간세포상관표면항체작표형감정,용Southern blotting검측MSCs적단립장도;응용면역형광염색기술검측단립중복서렬결합인자1(TRF1)화조유립세포백혈병단백소체(PML)적정위;이단립중복서렬확증법(TRAP)화/혹Western blotting법검측전대급분화성지방세포적MSCs화경동보화처리피조단재S기적MSCs적단립매표체.결과:여단립매음성ALT세포주WI-38-2RA세포상비,MSCs적단립장도교단병차단립장도변이도불대;단립조공상관단백TRF1화PML재MSCs중적정위칙여단립매양성세포HeLa세포상동,량자정비공정위,이재단립매음성WI-38-2RA세포중량자정공정위상태.MSCs중불존재유염색체외단립중복서렬DNA(ECTR DNA).TRAP법검측전대배양적MSCs단립매정음성표체,단분화성지방적MSCs단립매정양성표체.Western blotting 검측동보화처리전MSCs단립매정미약표체,경동보화처리피조단재S기시,MSCs적단립매표체명현증고,병차여S기적세포비례정정상관.결론:MSCs중불존재ALT상관적조유립세포백혈병단백소체(APBs)、염색체외단립중복서렬DNA(ECTR DNA)화단립장도교장、단립장도변이도대등ALT궤제상관분자특정;비동보화재S기처리적MSCs,단립매정미약표체,단유도향지방세포분화혹처재S기시,MSCs적단립매표체명현증고,병차여S기적세포비례정정상관.본연구제시MSCs시통과단립매궤제이불시단립연장방로도경(ALT)궤제조공기단립말단.