生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
8期
1327-1332
,共6页
孙玉磊%曹爱忠%杨学明%王晓云%陈佩度
孫玉磊%曹愛忠%楊學明%王曉雲%陳珮度
손옥뢰%조애충%양학명%왕효운%진패도
小麦-簇毛麦易位系%可转化人工染色体文库%Hv-S/TPK基因%荧光原位杂交
小麥-簇毛麥易位繫%可轉化人工染色體文庫%Hv-S/TPK基因%熒光原位雜交
소맥-족모맥역위계%가전화인공염색체문고%Hv-S/TPK기인%형광원위잡교
本实验室已经通过基因芯片技术筛选到一个白粉菌诱导后上调表达的抗病相关基因Hv-S/TPK,并获得了它的全长cDNA序列.利用Hv-S/TPK的特异引物筛选小麦-簇毛麦6VS/6AL易位系基因组可转化人工染色体(Transformation-competent artificial chromsome,TAC)文库.获得了阳性TAC单克隆,并进一步获得了含有Hv-S/TPKcDNA序列的5160 bp(GenBank Accession No.EU153366)的亚克隆.对亚克隆的序列分析结果表明,Hv-S/TPK基因在起始密码子和终止密码子之间有3个内含子和4个外显子,4个外显子序列与簇毛麦上已得到的Hv-S/TPK的cDNA序列100%同源.对起始密码子上游序列分析结果表明,该基因的调控序列中,含有W-Box、OCS-element等与抗病相关的元件.以TAC克隆为探针与小麦-簇毛麦6VS/6AL易位系有丝分裂中期染色体进行荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,HSH),结果表明含有Hv-S/TPK基因的TAC克隆来自于簇毛麦.
本實驗室已經通過基因芯片技術篩選到一箇白粉菌誘導後上調錶達的抗病相關基因Hv-S/TPK,併穫得瞭它的全長cDNA序列.利用Hv-S/TPK的特異引物篩選小麥-簇毛麥6VS/6AL易位繫基因組可轉化人工染色體(Transformation-competent artificial chromsome,TAC)文庫.穫得瞭暘性TAC單剋隆,併進一步穫得瞭含有Hv-S/TPKcDNA序列的5160 bp(GenBank Accession No.EU153366)的亞剋隆.對亞剋隆的序列分析結果錶明,Hv-S/TPK基因在起始密碼子和終止密碼子之間有3箇內含子和4箇外顯子,4箇外顯子序列與簇毛麥上已得到的Hv-S/TPK的cDNA序列100%同源.對起始密碼子上遊序列分析結果錶明,該基因的調控序列中,含有W-Box、OCS-element等與抗病相關的元件.以TAC剋隆為探針與小麥-簇毛麥6VS/6AL易位繫有絲分裂中期染色體進行熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,HSH),結果錶明含有Hv-S/TPK基因的TAC剋隆來自于簇毛麥.
본실험실이경통과기인심편기술사선도일개백분균유도후상조표체적항병상관기인Hv-S/TPK,병획득료타적전장cDNA서렬.이용Hv-S/TPK적특이인물사선소맥-족모맥6VS/6AL역위계기인조가전화인공염색체(Transformation-competent artificial chromsome,TAC)문고.획득료양성TAC단극륭,병진일보획득료함유Hv-S/TPKcDNA서렬적5160 bp(GenBank Accession No.EU153366)적아극륭.대아극륭적서렬분석결과표명,Hv-S/TPK기인재기시밀마자화종지밀마자지간유3개내함자화4개외현자,4개외현자서렬여족모맥상이득도적Hv-S/TPK적cDNA서렬100%동원.대기시밀마자상유서렬분석결과표명,해기인적조공서렬중,함유W-Box、OCS-element등여항병상관적원건.이TAC극륭위탐침여소맥-족모맥6VS/6AL역위계유사분렬중기염색체진행형광원위잡교(Fluorescence in situ hybridization,HSH),결과표명함유Hv-S/TPK기인적TAC극륭래자우족모맥.
