畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
6期
57-61
,共5页
靳木子%马玉珍%仓明%王瑞%任宇%刘东军
靳木子%馬玉珍%倉明%王瑞%任宇%劉東軍
근목자%마옥진%창명%왕서%임우%류동군
饲养层%胚胎干细胞%牛%成纤维细胞
飼養層%胚胎榦細胞%牛%成纖維細胞
사양층%배태간세포%우%성섬유세포
牛胚胎干细胞的培养一直未能确定最适合的饲养层,寻找一种适合于其生长的饲养层对于成功培养牛胚胎干细胞有重要意义.本研究以胎鼠和牛胎儿为材料,分别以含10%FBS的高糖DMEM和含10%FBS的DMEM F12为培养液,分离并且获得2～5代的胎鼠成纤维细胞和5～6代的牛胎儿成纤维细胞.在上述两种成纤维细胞为饲养层的条件下,采用含10%胎牛血清、0.1 mmol/L β-巯基乙醇、0.1 mmoL/L非必须氨基酸、100 U/mL青霉素、0.05 mg/mL链霉素、20 ng/mL LIF和10 ng/mL bFGF的DMEM F12培养液培养牛胚胎干细胞,来寻找一种适合于牛胚胎干细胞培养的饲养层.结果表明,在相同的培养体系条件下培养牛胚胎干细胞,以胎鼠成纤维细胞为饲养层的贴壁率显著高于以牛胎儿成纤维细胞为饲养层的贴壁率(P<0.05),以牛胎儿成纤维细胞为饲养层更利于胚胎滋养层的去除.
牛胚胎榦細胞的培養一直未能確定最適閤的飼養層,尋找一種適閤于其生長的飼養層對于成功培養牛胚胎榦細胞有重要意義.本研究以胎鼠和牛胎兒為材料,分彆以含10%FBS的高糖DMEM和含10%FBS的DMEM F12為培養液,分離併且穫得2～5代的胎鼠成纖維細胞和5～6代的牛胎兒成纖維細胞.在上述兩種成纖維細胞為飼養層的條件下,採用含10%胎牛血清、0.1 mmol/L β-巰基乙醇、0.1 mmoL/L非必鬚氨基痠、100 U/mL青黴素、0.05 mg/mL鏈黴素、20 ng/mL LIF和10 ng/mL bFGF的DMEM F12培養液培養牛胚胎榦細胞,來尋找一種適閤于牛胚胎榦細胞培養的飼養層.結果錶明,在相同的培養體繫條件下培養牛胚胎榦細胞,以胎鼠成纖維細胞為飼養層的貼壁率顯著高于以牛胎兒成纖維細胞為飼養層的貼壁率(P<0.05),以牛胎兒成纖維細胞為飼養層更利于胚胎滋養層的去除.
우배태간세포적배양일직미능학정최괄합적사양층,심조일충괄합우기생장적사양층대우성공배양우배태간세포유중요의의.본연구이태서화우태인위재료,분별이함10%FBS적고당DMEM화함10%FBS적DMEM F12위배양액,분리병차획득2～5대적태서성섬유세포화5～6대적우태인성섬유세포.재상술량충성섬유세포위사양층적조건하,채용함10%태우혈청、0.1 mmol/L β-구기을순、0.1 mmoL/L비필수안기산、100 U/mL청매소、0.05 mg/mL련매소、20 ng/mL LIF화10 ng/mL bFGF적DMEM F12배양액배양우배태간세포,래심조일충괄합우우배태간세포배양적사양층.결과표명,재상동적배양체계조건하배양우배태간세포,이태서성섬유세포위사양층적첩벽솔현저고우이우태인성섬유세포위사양층적첩벽솔(P<0.05),이우태인성섬유세포위사양층경리우배태자양층적거제.
