安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
15期
9274-9276
,共3页
马晓燕%张会彦%贾春凤%李慧%王羽%张先舟%张伟
馬曉燕%張會彥%賈春鳳%李慧%王羽%張先舟%張偉
마효연%장회언%가춘봉%리혜%왕우%장선주%장위
荧光定量PCR%检测%单核细胞增生性李斯特氏菌%锁定寡核苷酸
熒光定量PCR%檢測%單覈細胞增生性李斯特氏菌%鎖定寡覈苷痠
형광정량PCR%검측%단핵세포증생성리사특씨균%쇄정과핵감산
[目的]建立一种快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌的实时荧光定量PER方法.[方法]针对单核细胞增生性李斯特氏菌的特异基因hlyA,结合锁定寡核苷酸(LNA),设计引物和探针,利用阳性质粒和模拟标本建立单核细胞增生性李斯特氏菌实时定量荧光PCR检测方法.[结果]以单核细胞增生性李斯特氏菌为模板克隆了hlyA基因,得到阳性质粒,并进一步建立了荧光定量PCR方法,得到标准曲线Y=-3.273 X+37.640,相关系数R<'2>=1.000;该方法的灵敏度可以达到1.2×10 CFU/ml;人工污染猪肉检出限可以达到3.2×10<'2>CFU/ml.[结论]建立了快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌的实时荧光定量PCR方法,为实现食品中单核细胞增生性李斯特氏菌的快速检测构建了一个技术平台.
[目的]建立一種快速檢測單覈細胞增生性李斯特氏菌的實時熒光定量PER方法.[方法]針對單覈細胞增生性李斯特氏菌的特異基因hlyA,結閤鎖定寡覈苷痠(LNA),設計引物和探針,利用暘性質粒和模擬標本建立單覈細胞增生性李斯特氏菌實時定量熒光PCR檢測方法.[結果]以單覈細胞增生性李斯特氏菌為模闆剋隆瞭hlyA基因,得到暘性質粒,併進一步建立瞭熒光定量PCR方法,得到標準麯線Y=-3.273 X+37.640,相關繫數R<'2>=1.000;該方法的靈敏度可以達到1.2×10 CFU/ml;人工汙染豬肉檢齣限可以達到3.2×10<'2>CFU/ml.[結論]建立瞭快速檢測單覈細胞增生性李斯特氏菌的實時熒光定量PCR方法,為實現食品中單覈細胞增生性李斯特氏菌的快速檢測構建瞭一箇技術平檯.
[목적]건립일충쾌속검측단핵세포증생성리사특씨균적실시형광정량PER방법.[방법]침대단핵세포증생성리사특씨균적특이기인hlyA,결합쇄정과핵감산(LNA),설계인물화탐침,이용양성질립화모의표본건립단핵세포증생성리사특씨균실시정량형광PCR검측방법.[결과]이단핵세포증생성리사특씨균위모판극륭료hlyA기인,득도양성질립,병진일보건립료형광정량PCR방법,득도표준곡선Y=-3.273 X+37.640,상관계수R<'2>=1.000;해방법적령민도가이체도1.2×10 CFU/ml;인공오염저육검출한가이체도3.2×10<'2>CFU/ml.[결론]건립료쾌속검측단핵세포증생성리사특씨균적실시형광정량PCR방법,위실현식품중단핵세포증생성리사특씨균적쾌속검측구건료일개기술평태.
