遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2006年
5期
557-562
,共6页
庄娟%尤永进%陈波%饶忠%潘洁
莊娟%尤永進%陳波%饒忠%潘潔
장연%우영진%진파%요충%반길
口蹄疫病毒%VP1%T细胞表位%B细胞表位%肠毒素大肠杆菌%LTB%STⅠ%免疫应答
口蹄疫病毒%VP1%T細胞錶位%B細胞錶位%腸毒素大腸桿菌%LTB%STⅠ%免疫應答
구제역병독%VP1%T세포표위%B세포표위%장독소대장간균%LTB%STⅠ%면역응답
合成O型口蹄疫病毒VP1蛋白中与细胞免疫(21~40表位肽)及体液免疫(141~160表位肽)相关的基因序列2020VP1,运用基因工程技术构建了含有肠毒素大肠杆菌LTB、STⅠ基因及双拷贝2020VP1的融合表达载体r2020-B-2020-STⅠ,转化宿主菌 BL21(DE3) RIL后的表达产物经SDS-PAGE分析,结果显示重组融合蛋白的分子量约为45 kDa,表达量较高.ELISA实验结果显示,融合蛋白能与霍乱毒素(cholera toxin)CTB抗体特异结合.动物实验表明,融合蛋白能够诱发兔体产生较强的FMDV中和抗体,免疫豚鼠在低浓度FMDV刺激下能够产生特异性T淋巴细胞增殖反应,说明融合蛋白能诱导机体产生FMDV特异性细胞及体液免疫反应;同时,融合蛋白免疫雌鼠能够抵抗大肠杆菌强毒株攻击,免疫兔体能够产生STⅠ中和抗体,且融合蛋白不具STⅠ毒性,证明融合蛋白具有良好的LTB、STⅠ免疫原性.实验结果表明,此融合蛋白具有开发成为口蹄疫及肠毒素腹泻联合疫苗的应用价值.
閤成O型口蹄疫病毒VP1蛋白中與細胞免疫(21~40錶位肽)及體液免疫(141~160錶位肽)相關的基因序列2020VP1,運用基因工程技術構建瞭含有腸毒素大腸桿菌LTB、STⅠ基因及雙拷貝2020VP1的融閤錶達載體r2020-B-2020-STⅠ,轉化宿主菌 BL21(DE3) RIL後的錶達產物經SDS-PAGE分析,結果顯示重組融閤蛋白的分子量約為45 kDa,錶達量較高.ELISA實驗結果顯示,融閤蛋白能與霍亂毒素(cholera toxin)CTB抗體特異結閤.動物實驗錶明,融閤蛋白能夠誘髮兔體產生較彊的FMDV中和抗體,免疫豚鼠在低濃度FMDV刺激下能夠產生特異性T淋巴細胞增殖反應,說明融閤蛋白能誘導機體產生FMDV特異性細胞及體液免疫反應;同時,融閤蛋白免疫雌鼠能夠牴抗大腸桿菌彊毒株攻擊,免疫兔體能夠產生STⅠ中和抗體,且融閤蛋白不具STⅠ毒性,證明融閤蛋白具有良好的LTB、STⅠ免疫原性.實驗結果錶明,此融閤蛋白具有開髮成為口蹄疫及腸毒素腹瀉聯閤疫苗的應用價值.
합성O형구제역병독VP1단백중여세포면역(21~40표위태)급체액면역(141~160표위태)상관적기인서렬2020VP1,운용기인공정기술구건료함유장독소대장간균LTB、STⅠ기인급쌍고패2020VP1적융합표체재체r2020-B-2020-STⅠ,전화숙주균 BL21(DE3) RIL후적표체산물경SDS-PAGE분석,결과현시중조융합단백적분자량약위45 kDa,표체량교고.ELISA실험결과현시,융합단백능여곽란독소(cholera toxin)CTB항체특이결합.동물실험표명,융합단백능구유발토체산생교강적FMDV중화항체,면역돈서재저농도FMDV자격하능구산생특이성T림파세포증식반응,설명융합단백능유도궤체산생FMDV특이성세포급체액면역반응;동시,융합단백면역자서능구저항대장간균강독주공격,면역토체능구산생STⅠ중화항체,차융합단백불구STⅠ독성,증명융합단백구유량호적LTB、STⅠ면역원성.실험결과표명,차융합단백구유개발성위구제역급장독소복사연합역묘적응용개치.