南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2006年
7期
914-917
,共4页
秦立赟%陈士岭%张曦倩%王炎秋
秦立赟%陳士嶺%張晞倩%王炎鞦
진립빈%진사령%장희천%왕염추
绒毛外细胞滋养层细胞%蜕膜基质细胞%共培养%侵袭%Transwell
絨毛外細胞滋養層細胞%蛻膜基質細胞%共培養%侵襲%Transwell
융모외세포자양층세포%세막기질세포%공배양%침습%Transwell
目的模拟体内环境,建立可保持绒毛外细胞滋养层细胞(EVCT)与蜕膜基质细胞(DSC)生物学特性的共培养细胞模型,应用于研究滋养细胞的侵袭行为.方法利用胰酶消化和BSA、Percoll梯度沉降,收集纯化人早孕绒毛组织的EVCT和DSC,分别放入Transwell的上下小室,观察该模型下细胞形态变化及侵袭特性,免疫组化、免疫荧光染色检测细胞的纯度.结果免疫组化显示EVCT的细胞角蛋白7阳性表达的细胞数占95%以上,阳性表达转化生长因子β2的细胞数占95%以上,DSC泌乳素阳性表达的细胞数也超过95%,证实共培养系统中EVCT和DSC纯度均在95%以上,且生物学特性得以维持.上室中的EVCT保持了其侵袭能力,在Matrigel包被的滤膜上EVCT的侵袭指数为3.22±0.04.结论适当的培养方法可获得高纯度的EVCT和DSC,并使其维持特有的生物学活性,成功地建立了共培养系统模型,便于研究滋养细胞侵袭和胚胎着床的机制.
目的模擬體內環境,建立可保持絨毛外細胞滋養層細胞(EVCT)與蛻膜基質細胞(DSC)生物學特性的共培養細胞模型,應用于研究滋養細胞的侵襲行為.方法利用胰酶消化和BSA、Percoll梯度沉降,收集純化人早孕絨毛組織的EVCT和DSC,分彆放入Transwell的上下小室,觀察該模型下細胞形態變化及侵襲特性,免疫組化、免疫熒光染色檢測細胞的純度.結果免疫組化顯示EVCT的細胞角蛋白7暘性錶達的細胞數佔95%以上,暘性錶達轉化生長因子β2的細胞數佔95%以上,DSC泌乳素暘性錶達的細胞數也超過95%,證實共培養繫統中EVCT和DSC純度均在95%以上,且生物學特性得以維持.上室中的EVCT保持瞭其侵襲能力,在Matrigel包被的濾膜上EVCT的侵襲指數為3.22±0.04.結論適噹的培養方法可穫得高純度的EVCT和DSC,併使其維持特有的生物學活性,成功地建立瞭共培養繫統模型,便于研究滋養細胞侵襲和胚胎著床的機製.
목적모의체내배경,건립가보지융모외세포자양층세포(EVCT)여세막기질세포(DSC)생물학특성적공배양세포모형,응용우연구자양세포적침습행위.방법이용이매소화화BSA、Percoll제도침강,수집순화인조잉융모조직적EVCT화DSC,분별방입Transwell적상하소실,관찰해모형하세포형태변화급침습특성,면역조화、면역형광염색검측세포적순도.결과면역조화현시EVCT적세포각단백7양성표체적세포수점95%이상,양성표체전화생장인자β2적세포수점95%이상,DSC비유소양성표체적세포수야초과95%,증실공배양계통중EVCT화DSC순도균재95%이상,차생물학특성득이유지.상실중적EVCT보지료기침습능력,재Matrigel포피적려막상EVCT적침습지수위3.22±0.04.결론괄당적배양방법가획득고순도적EVCT화DSC,병사기유지특유적생물학활성,성공지건립료공배양계통모형,편우연구자양세포침습화배태착상적궤제.