CAJ | 학술논문

为建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157:H7的多重PCR方法,根据GenBank上已发表的大肠杆菌O157:H7菌体抗原和鞭毛抗原的基因序列(rfbE和fliC基因)设计2对特异引物,分别建立针对rfbE fliC基因的单一PCR方法；通过优化扩增条件,进一步建立可用于动物粪便检测的大肠杆菌多重PCR方法,并进行特异性和灵敏性试验,同时还初步应用到临床样品的检测中.结果表明:所建立的多重PCR方法能同时扩增出rfbE基因(327 bp)和fliC基因( 247 bp)的特异性片段,特异性结果显示其他非大肠杆菌O157:H7的扩增结果均为阴性,表明该方法有较高的特异性；灵敏度试验结果显示细菌纯培养物的检测灵敏度为102cfu/mL.通过试验初步建立了快速、灵敏、特异的检测大肠杆菌O157:H7的多重PCR方法,为从动物粪便中分离鉴定大肠杆菌O157:H7提供了一种简单、灵敏的试验方法,可用于临床动物携带大肠杆菌O157:H7的分子流行病学调查.
위건립쾌속、특이적분리감정대장간균O157:H7적다중PCR방법,근거GenBank상이발표적대장간균O157:H7균체항원화편모항원적기인서렬(rfbE화fliC기인)설계2대특이인물,분별건립침대rfbE fliC기인적단일PCR방법；통과우화확증조건,진일보건립가용우동물분편검측적대장간균다중PCR방법,병진행특이성화령민성시험,동시환초보응용도림상양품적검측중.결과표명:소건립적다중PCR방법능동시확증출rfbE기인(327 bp)화fliC기인( 247 bp)적특이성편단,특이성결과현시기타비대장간균O157:H7적확증결과균위음성,표명해방법유교고적특이성；령민도시험결과현시세균순배양물적검측령민도위102cfu/mL.통과시험초보건립료쾌속、령민、특이적검측대장간균O157:H7적다중PCR방법,위종동물분편중분리감정대장간균O157:H7제공료일충간단、령민적시험방법,가용우림상동물휴대대장간균O157:H7적분자류행병학조사.