CAJ | 학술논문

目的探讨PTEN基因对RPMI8226细胞增殖、细胞周期和侵袭力的影响及其分子作用机制.方法应用PTEN siRNA转染RPMI8226细胞,封闭内源性PTEN mRNA表达.MTT法检测细胞生长曲线；流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡；Transwell小室实验检测细胞侵袭活性；荧光定量PCR(FQ-PCR)检测mRNA水平变化,Western印迹检测蛋白水平变化.结果 PTEN siRNA能明显抑制RPMI8226细胞PTEN mRNA及蛋白表达.MTT结果显示,转染后4d,与NS-siRNA组相比,PTEN-siRNA组细胞生存率为(141.55±8.34)％(P＜0.01).细胞周期分析显示PTEN-siRNA转染RPMI8226细胞48 h后,与未转染细胞相比,处于G0/G1期细胞比例升高,G2/M期和S期细胞比例降低,凋亡峰显示凋亡的细胞比例减少.PTEN-siRNA转染RPMI8226细胞后24h,未转染组、NS-siRNA转染组和PTEN-siRNA转染组黏附于下室面的细胞数量分别为:49.33±7.63、47.17 ±7.76和79.50±11.89,NS-siRNA和PTEN-siRNA组相比,差异显著(P＜0.01).转染PTEN siRNA后凋亡相关基因Survivin mRNA及蛋白表达水平增加,Caspase-3/-7 mRNA及蛋白活性表达水平减低.FAK mRNA MMP-2,MMP-9 mRNA p-FAK蛋白表达水平升高.结论转染PTEN siRNA能够促进RPMI8226细胞增殖及侵袭能力,抑制细胞凋亡.
목적 탐토PTEN기인대RPMI8226세포증식、세포주기화침습력적영향급기분자작용궤제.방법 응용PTEN siRNA전염RPMI8226세포,봉폐내원성PTEN mRNA표체.MTT법검측세포생장곡선；류식세포의검측세포주기분포급조망；Transwell소실실험검측세포침습활성；형광정량PCR(FQ-PCR)검측mRNA수평변화,Western인적검측단백수평변화.결과 PTEN siRNA능명현억제RPMI8226세포PTEN mRNA급단백표체.MTT결과현시,전염후4d,여NS-siRNA조상비,PTEN-siRNA조세포생존솔위(141.55±8.34)％(P＜0.01).세포주기분석현시PTEN-siRNA전염RPMI8226세포48 h후,여미전염세포상비,처우G0/G1기세포비례승고,G2/M기화S기세포비례강저,조망봉현시조망적세포비례감소.PTEN-siRNA전염RPMI8226세포후24h,미전염조、NS-siRNA전염조화PTEN-siRNA전염조점부우하실면적세포수량분별위:49.33±7.63、47.17 ±7.76화79.50±11.89,NS-siRNA화PTEN-siRNA조상비,차이현저(P＜0.01).전염PTEN siRNA후조망상관기인Survivin mRNA급단백표체수평증가,Caspase-3/-7 mRNA급단백활성표체수평감저.FAK mRNA MMP-2,MMP-9 mRNA p-FAK단백표체수평승고.결론 전염PTEN siRNA능구촉진RPMI8226세포증식급침습능력,억제세포조망.