中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
7期
1267-1270
,共4页
周敏%钱嫣蓉%张秋蕊%程挺%万欢英
週敏%錢嫣蓉%張鞦蕊%程挺%萬歡英
주민%전언용%장추예%정정%만환영
细胞因子信号转导抑制因子1%慢病毒载体%RNA干扰%A549%细胞%组织构建
細胞因子信號轉導抑製因子1%慢病毒載體%RNA榦擾%A549%細胞%組織構建
세포인자신호전도억제인자1%만병독재체%RNA간우%A549%세포%조직구건
背景:以往关于细胞因子信号转导抑制因子1 的研究多用脂质体或其他载体转染的技术,但存在效率低和安全性差等问题.目的:构建细胞因子信号转导抑制因子1 RNA 干扰慢病毒载体并进行鉴定.方法:实验设计3 组针对细胞因子信号转导抑制因子1 的短发夹RNA 序列,应用基因重组技术插入pPll3.7 载体,测序正确的重组病毒质粒与包装质粒通过共转染293T 细胞,培养48 h 后,收集细胞培养上清液,感染A549 细胞,western blot 检测目的蛋白细胞因子信号转导抑制因子1 在靶细胞中的表达.结果与结论:实验通过对重组载体进行测序分析证实短发夹RNA 插入慢病毒载体,慢病毒载体上清成功转染A549 细胞后western blot 检测结果显示该载体抑制了细胞因子信号转导抑制因子1 蛋白在A549 细胞有表达.说明实验成功构建了细胞因子信号转导抑制因子1 RNA 干扰慢病毒载体.
揹景:以往關于細胞因子信號轉導抑製因子1 的研究多用脂質體或其他載體轉染的技術,但存在效率低和安全性差等問題.目的:構建細胞因子信號轉導抑製因子1 RNA 榦擾慢病毒載體併進行鑒定.方法:實驗設計3 組針對細胞因子信號轉導抑製因子1 的短髮夾RNA 序列,應用基因重組技術插入pPll3.7 載體,測序正確的重組病毒質粒與包裝質粒通過共轉染293T 細胞,培養48 h 後,收集細胞培養上清液,感染A549 細胞,western blot 檢測目的蛋白細胞因子信號轉導抑製因子1 在靶細胞中的錶達.結果與結論:實驗通過對重組載體進行測序分析證實短髮夾RNA 插入慢病毒載體,慢病毒載體上清成功轉染A549 細胞後western blot 檢測結果顯示該載體抑製瞭細胞因子信號轉導抑製因子1 蛋白在A549 細胞有錶達.說明實驗成功構建瞭細胞因子信號轉導抑製因子1 RNA 榦擾慢病毒載體.
배경:이왕관우세포인자신호전도억제인자1 적연구다용지질체혹기타재체전염적기술,단존재효솔저화안전성차등문제.목적:구건세포인자신호전도억제인자1 RNA 간우만병독재체병진행감정.방법:실험설계3 조침대세포인자신호전도억제인자1 적단발협RNA 서렬,응용기인중조기술삽입pPll3.7 재체,측서정학적중조병독질립여포장질립통과공전염293T 세포,배양48 h 후,수집세포배양상청액,감염A549 세포,western blot 검측목적단백세포인자신호전도억제인자1 재파세포중적표체.결과여결론:실험통과대중조재체진행측서분석증실단발협RNA 삽입만병독재체,만병독재체상청성공전염A549 세포후western blot 검측결과현시해재체억제료세포인자신호전도억제인자1 단백재A549 세포유표체.설명실험성공구건료세포인자신호전도억제인자1 RNA 간우만병독재체.