南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
3期
52-56
,共5页
王永%纪燕玲%王晗%陈永敢%王志伟
王永%紀燕玲%王晗%陳永敢%王誌偉
왕영%기연령%왕함%진영감%왕지위
禾本科植物内生真菌%基因组DNA的提取%NRPS基因%PCR扩增%序列比对
禾本科植物內生真菌%基因組DNA的提取%NRPS基因%PCR擴增%序列比對
화본과식물내생진균%기인조DNA적제취%NRPS기인%PCR확증%서렬비대
调查我国7省12个不同地区的禾本科植物内生真菌,经分离、培养后鉴定得到2种Epichlo(e)属和4种Neotyphodium属内生真菌.采用改良的QS( improved quick and safe,IQS)法进行禾本科植物内生真菌基因组DNA的提取,并通过PCR进行验证.以生长在平板上的菌丝为起始材料,仪器要求简单、操作简便,快速安全、省时省力,整个提取过程大约40 min.该方法和常规SDS法相比,时间缩短到2周,为原来的1/4.以IQS法提取的DNA为模板,检测禾本科植物内生真菌中的NRPS基因,并在NCBl上进行比对分析,发现与已有的NRPS基因高度相似.这种快速提取法所获得的基因组DNA质量高,可用于后续PCR、基因克隆及其他高通量测试,特别适合获取大量真菌菌株基因组DNA时使用.
調查我國7省12箇不同地區的禾本科植物內生真菌,經分離、培養後鑒定得到2種Epichlo(e)屬和4種Neotyphodium屬內生真菌.採用改良的QS( improved quick and safe,IQS)法進行禾本科植物內生真菌基因組DNA的提取,併通過PCR進行驗證.以生長在平闆上的菌絲為起始材料,儀器要求簡單、操作簡便,快速安全、省時省力,整箇提取過程大約40 min.該方法和常規SDS法相比,時間縮短到2週,為原來的1/4.以IQS法提取的DNA為模闆,檢測禾本科植物內生真菌中的NRPS基因,併在NCBl上進行比對分析,髮現與已有的NRPS基因高度相似.這種快速提取法所穫得的基因組DNA質量高,可用于後續PCR、基因剋隆及其他高通量測試,特彆適閤穫取大量真菌菌株基因組DNA時使用.
조사아국7성12개불동지구적화본과식물내생진균,경분리、배양후감정득도2충Epichlo(e)속화4충Neotyphodium속내생진균.채용개량적QS( improved quick and safe,IQS)법진행화본과식물내생진균기인조DNA적제취,병통과PCR진행험증.이생장재평판상적균사위기시재료,의기요구간단、조작간편,쾌속안전、성시성력,정개제취과정대약40 min.해방법화상규SDS법상비,시간축단도2주,위원래적1/4.이IQS법제취적DNA위모판,검측화본과식물내생진균중적NRPS기인,병재NCBl상진행비대분석,발현여이유적NRPS기인고도상사.저충쾌속제취법소획득적기인조DNA질량고,가용우후속PCR、기인극륭급기타고통량측시,특별괄합획취대량진균균주기인조DNA시사용.
