CAJ | 학술논문

Toll样受体4(Toll-1ike receptor 4,TLR4)在机体的免疫反应中发挥重要作用,该基因突变会影响受体的信号转导能力和机体的疾病抗性/易感性.文章在前期工作的基础上,进一步分析c.611 T>A(p.Leu204His)、c.1027C>A(p.Gin343LyS)和c.1605 G>T(p.Leu535Phe)3个错义突变对猪TLR4功能的影响.利用RT-PCR方法克隆猪TLR4基因全长编码区并引入定点突变;利用真核表达、双荧光素酶报告系统和Western blotting方法在瞬时转染的PK-15细胞内研究3个单核苷酸多,态(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)对猪TLR4配体识别和信号转导能力的影响;同时,利用创造酶切位点PCR-RFLP方法分析对TLR4活性有显著影响的点突变在民猪、大白,长白和中国东北野猪4个群体中的分布.结果,成功获得了民猪TLR4基因的金长编码区和3个单碱基变异体,构建了不同等位基因的真核表达载体,在PK-15细胞内确定了c.1605 G>T变异导致TLR4向下游传递信号的能力显著降低(P<0.01),该SNP只存在于民猪和野猪中且频率较高.猪TLR4基因c.1605 G>T变异影响Toll样受体的信号传递,可能和机体的疾病抗性/易感性有关.
Toll양수체4(Toll-1ike receptor 4,TLR4)재궤체적면역반응중발휘중요작용,해기인돌변회영향수체적신호전도능력화궤체적질병항성/역감성.문장재전기공작적기출상,진일보분석c.611 T>A(p.Leu204His)、c.1027C>A(p.Gin343LyS)화c.1605 G>T(p.Leu535Phe)3개착의돌변대저TLR4공능적영향.이용RT-PCR방법극륭저TLR4기인전장편마구병인입정점돌변;이용진핵표체、쌍형광소매보고계통화Western blotting방법재순시전염적PK-15세포내연구3개단핵감산다,태(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)대저TLR4배체식별화신호전도능력적영향;동시,이용창조매절위점PCR-RFLP방법분석대TLR4활성유현저영향적점돌변재민저、대백,장백화중국동북야저4개군체중적분포.결과,성공획득료민저TLR4기인적금장편마구화3개단감기변이체,구건료불동등위기인적진핵표체재체,재PK-15세포내학정료c.1605 G>T변이도치TLR4향하유전체신호적능력현저강저(P<0.01),해SNP지존재우민저화야저중차빈솔교고.저TLR4기인c.1605 G>T변이영향Toll양수체적신호전체,가능화궤체적질병항성/역감성유관.