中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2006年
1期
57-59
,共3页
孙立臣%张柏和%苏长青%李根丛%吴孟超%钱其军
孫立臣%張柏和%囌長青%李根叢%吳孟超%錢其軍
손립신%장백화%소장청%리근총%오맹초%전기군
腺病毒%端粒酶%缺氧诱导因子%干扰素-γ
腺病毒%耑粒酶%缺氧誘導因子%榦擾素-γ
선병독%단립매%결양유도인자%간우소-γ
目的研制出一种新的基因-病毒治疗系统.方法通过基因操作技术将主要晚期启动子(MLP)调控的人干扰素-γ基因插入腺病毒E1A基因受hTERT启动子调控、E1B基因受HRE启动子调控的增殖病毒载体质粒PXC70-HRE-TP的E1A上游,得到腺病毒质粒pSG500-hγ.通过pSG500-hγ与质粒pBHGE3在293细胞中同源重组得到重组病毒CNHK500-hγ.用TCID50方法测定病毒滴度.通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力.利用ELISA法检测人干扰素-γ抗癌基因的表达.结果CNHK500-hγ的病毒滴度为4×109 pfu/ml,增殖实验结果证实CNHK500-hγ可以选择性地在端粒酶阳性的肝癌细胞中增殖,CNHK500-hγ所携带的人干扰素-γ基因在肝癌细胞株中的表达量(442μg/L)明显高于携带该基因的非增殖型腺病毒载体(120 μg/L)Ad-hγ(P＜0.005).结论CNHK500-hγ是一种具备治疗肝癌潜力的新型基因-病毒治疗系统.
目的研製齣一種新的基因-病毒治療繫統.方法通過基因操作技術將主要晚期啟動子(MLP)調控的人榦擾素-γ基因插入腺病毒E1A基因受hTERT啟動子調控、E1B基因受HRE啟動子調控的增殖病毒載體質粒PXC70-HRE-TP的E1A上遊,得到腺病毒質粒pSG500-hγ.通過pSG500-hγ與質粒pBHGE3在293細胞中同源重組得到重組病毒CNHK500-hγ.用TCID50方法測定病毒滴度.通過增殖實驗觀察重組病毒的選擇性增殖能力.利用ELISA法檢測人榦擾素-γ抗癌基因的錶達.結果CNHK500-hγ的病毒滴度為4×109 pfu/ml,增殖實驗結果證實CNHK500-hγ可以選擇性地在耑粒酶暘性的肝癌細胞中增殖,CNHK500-hγ所攜帶的人榦擾素-γ基因在肝癌細胞株中的錶達量(442μg/L)明顯高于攜帶該基因的非增殖型腺病毒載體(120 μg/L)Ad-hγ(P＜0.005).結論CNHK500-hγ是一種具備治療肝癌潛力的新型基因-病毒治療繫統.
목적연제출일충신적기인-병독치료계통.방법통과기인조작기술장주요만기계동자(MLP)조공적인간우소-γ기인삽입선병독E1A기인수hTERT계동자조공、E1B기인수HRE계동자조공적증식병독재체질립PXC70-HRE-TP적E1A상유,득도선병독질립pSG500-hγ.통과pSG500-hγ여질립pBHGE3재293세포중동원중조득도중조병독CNHK500-hγ.용TCID50방법측정병독적도.통과증식실험관찰중조병독적선택성증식능력.이용ELISA법검측인간우소-γ항암기인적표체.결과CNHK500-hγ적병독적도위4×109 pfu/ml,증식실험결과증실CNHK500-hγ가이선택성지재단립매양성적간암세포중증식,CNHK500-hγ소휴대적인간우소-γ기인재간암세포주중적표체량(442μg/L)명현고우휴대해기인적비증식형선병독재체(120 μg/L)Ad-hγ(P＜0.005).결론CNHK500-hγ시일충구비치료간암잠력적신형기인-병독치료계통.
