CAJ | 학술논문

目的通过克隆孤儿核受体(Nurrl)基因并转染大鼠的骨髓基质细胞(MSCs),探讨Nurrl基因对MSCs在三七总皂甙(tPNS)和全反式维甲酸(ATRA)的联合诱导下向神经元分化的影响.方法构建pcDNA3.1-hygro-Nurrl表达质粒,应用脂质体Lipofectamine 2000转染MSCs.转染前MSCs以相同的密度铺6孔板,并随机设置4个实验组,分别是:Nurrl+tPNS/ATRA组、tPNS/ATRA组、Nurrl组和对照组,利用免疫细胞化学方法检测Nurrl基因的表达.转染48 h对Nurrl+tPNS/ATRA组和tPNS/ATRA组的细胞,依次给予β-疏基乙醇(BME)预诱导和tPNS/ATRA诱导,而Nurrl组和对照组的细胞除给予培养基代替tPNS/ATRA诱导剂外,其余步骤均相同;检测4组细胞的酪氨酸羟化酶(TH)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和γ-氨基丁酸(GABA)抗体的免疫细胞化学结果并统计各组阳性细胞的比例.结果免疫细胞化学显示,转染的骨髓基质细胞表达Nurrl蛋白;Nurrl+tPNS/ATRA组TH阳性细胞比例明显高于tPNS/ATRA组,分别是(38.4±4.6)%和(5.9±3.4)%.结论用tPNS/ATRA作诱导剂,转染Nurrl的MSCs诱导后TH阳性细胞的比例明显高于未转染组,差别有统计学意义;tPNS/ATRA诱导MSCs分化成神经元细胞的作用明确.
목적 통과극륭고인핵수체(Nurrl)기인병전염대서적골수기질세포(MSCs),탐토Nurrl기인대MSCs재삼칠총조대(tPNS)화전반식유갑산(ATRA)적연합유도하향신경원분화적영향.방법 구건pcDNA3.1-hygro-Nurrl표체질립,응용지질체Lipofectamine 2000전염MSCs.전염전MSCs이상동적밀도포6공판,병수궤설치4개실험조,분별시:Nurrl+tPNS/ATRA조、tPNS/ATRA조、Nurrl조화대조조,이용면역세포화학방법검측Nurrl기인적표체.전염48 h대Nurrl+tPNS/ATRA조화tPNS/ATRA조적세포,의차급여β-소기을순(BME)예유도화tPNS/ATRA유도,이Nurrl조화대조조적세포제급여배양기대체tPNS/ATRA유도제외,기여보취균상동;검측4조세포적락안산간화매(TH)、을선담감지매(AChE)화γ-안기정산(GABA)항체적면역세포화학결과병통계각조양성세포적비례.결과 면역세포화학현시,전염적골수기질세포표체Nurrl단백;Nurrl+tPNS/ATRA조TH양성세포비례명현고우tPNS/ATRA조,분별시(38.4±4.6)%화(5.9±3.4)%.결론 용tPNS/ATRA작유도제,전염Nurrl적MSCs유도후TH양성세포적비례명현고우미전염조,차별유통계학의의;tPNS/ATRA유도MSCs분화성신경원세포적작용명학.