中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2007年
2期
146-150
,共5页
骆丹%缪旭%吉玺%吴迪%徐丽贤%朱洁%林向飞
駱丹%繆旭%吉璽%吳迪%徐麗賢%硃潔%林嚮飛
락단%무욱%길새%오적%서려현%주길%림향비
朗格汉斯细胞(LC)%密度梯度离心%免疫磁珠%咪喹莫特%细胞因子
朗格漢斯細胞(LC)%密度梯度離心%免疫磁珠%咪喹莫特%細胞因子
랑격한사세포(LC)%밀도제도리심%면역자주%미규막특%세포인자
目的:探讨获取较高纯度和活性人表皮朗格汉斯细胞(Langerhans cell, LC)的实验方法,并观察分选所获人表皮LC接受免疫调节剂咪喹莫特刺激后细胞因子mRNA表达的变化.方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分选后的细胞用结合有FITC的鼠抗人CD1a单抗标记,经流式细胞仪检测LC纯化率,采用0.4%台盼蓝染色检测细胞的活性.将人表皮LC分为实验组和对照组,实验组加5 μg/ml咪喹莫特,对照组不加药,处理4小时后提取总RNA,采用RT-PCR法检测各组细胞中细胞因子TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA的表达量.结果:流式细胞仪检测分选后LC纯化率为84.48%,台盼蓝染色显示细胞活性＞95%.LC经咪喹莫特处理后的实验组TNF-α、IL-1β及IL-6三种细胞因子mRNA表达量均较对照组显著增高(P＜0.05).结论:联合应用密度梯度离心和免疫磁珠法,可获得较高纯度、有活性的LC细胞,且具有操作简单、易于无菌条件下分离纯化的优点.LC能接受咪喹莫特刺激而上调细胞因子mRNA的表达.
目的:探討穫取較高純度和活性人錶皮朗格漢斯細胞(Langerhans cell, LC)的實驗方法,併觀察分選所穫人錶皮LC接受免疫調節劑咪喹莫特刺激後細胞因子mRNA錶達的變化.方法:聯閤採用密度梯度離心和免疫磁珠的方法分離純化人錶皮LC,將分選後的細胞用結閤有FITC的鼠抗人CD1a單抗標記,經流式細胞儀檢測LC純化率,採用0.4%檯盼藍染色檢測細胞的活性.將人錶皮LC分為實驗組和對照組,實驗組加5 μg/ml咪喹莫特,對照組不加藥,處理4小時後提取總RNA,採用RT-PCR法檢測各組細胞中細胞因子TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA的錶達量.結果:流式細胞儀檢測分選後LC純化率為84.48%,檯盼藍染色顯示細胞活性＞95%.LC經咪喹莫特處理後的實驗組TNF-α、IL-1β及IL-6三種細胞因子mRNA錶達量均較對照組顯著增高(P＜0.05).結論:聯閤應用密度梯度離心和免疫磁珠法,可穫得較高純度、有活性的LC細胞,且具有操作簡單、易于無菌條件下分離純化的優點.LC能接受咪喹莫特刺激而上調細胞因子mRNA的錶達.
목적:탐토획취교고순도화활성인표피랑격한사세포(Langerhans cell, LC)적실험방법,병관찰분선소획인표피LC접수면역조절제미규막특자격후세포인자mRNA표체적변화.방법:연합채용밀도제도리심화면역자주적방법분리순화인표피LC,장분선후적세포용결합유FITC적서항인CD1a단항표기,경류식세포의검측LC순화솔,채용0.4%태반람염색검측세포적활성.장인표피LC분위실험조화대조조,실험조가5 μg/ml미규막특,대조조불가약,처리4소시후제취총RNA,채용RT-PCR법검측각조세포중세포인자TNF-α、IL-1β급IL-6 mRNA적표체량.결과:류식세포의검측분선후LC순화솔위84.48%,태반람염색현시세포활성＞95%.LC경미규막특처리후적실험조TNF-α、IL-1β급IL-6삼충세포인자mRNA표체량균교대조조현저증고(P＜0.05).결론:연합응용밀도제도리심화면역자주법,가획득교고순도、유활성적LC세포,차구유조작간단、역우무균조건하분리순화적우점.LC능접수미규막특자격이상조세포인자mRNA적표체.
