医学临床研究
醫學臨床研究
의학림상연구
JOURNAL OF CLINICAL RESEARCH
2009年
9期
1572-1576
,共5页
曾纪章%张丕红%李莉莉%任利成%梁鹏飞%黄晓元
曾紀章%張丕紅%李莉莉%任利成%樑鵬飛%黃曉元
증기장%장비홍%리리리%임리성%량붕비%황효원
烧伤%中性白细胞%蛋白质类%兔
燒傷%中性白細胞%蛋白質類%兔
소상%중성백세포%단백질류%토
[目的]研究严重烫伤对家兔外周血中性粒细胞蛋白质组的影响.[方法]12只家兔分为A、B两组(每组6只),A组为对照组(假烫处理)、B组为严重烫伤组(30%TBSA,Ⅲ度).A组假烫、B组烫伤后24h经颈动脉采血分离中性粒细胞.裂解细胞,提取蛋白质.利用固相pH梯度胶条(240mm×3mm×0.5mm,pH 3~10)及SDS-PAGE双向凝胶电泳分离蛋白质,考马斯亮蓝染色,图像扫描,PDQuest软件分析图像,筛选出差异表达蛋白质点.再从凝胶上切割差异蛋白质点,胰酶消化,应用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱分析,得到肽质量指纹图,再利用Mascot软件搜索数据库,鉴定蛋白质.[结果]建立了家兔外周血中性粒细胞蛋白质2-DE图谱.A、B组平均蛋白质点数分别为(759±20)个、(749±27)个,平均匹配率分别为93%、91%.两组间筛选出19个差异蛋白质点,鉴定了其中8个,包括7种蛋白质.[结论]家兔严重烫伤后外周血中性粒细胞蛋白质组发生改变,表达变化的蛋白质包括蛋白质二硫键异构酶、β-肌动蛋白、膜联蛋白Ⅰ、巯基特异性抗氧化蛋白等,功能涉及细胞内酶活性、细胞能动功能及可变形性、炎症、代谢、抗氧化能力、细胞凋亡等,这些蛋白质与严重烧伤后中性粒细胞功能改变有关.
[目的]研究嚴重燙傷對傢兔外週血中性粒細胞蛋白質組的影響.[方法]12隻傢兔分為A、B兩組(每組6隻),A組為對照組(假燙處理)、B組為嚴重燙傷組(30%TBSA,Ⅲ度).A組假燙、B組燙傷後24h經頸動脈採血分離中性粒細胞.裂解細胞,提取蛋白質.利用固相pH梯度膠條(240mm×3mm×0.5mm,pH 3~10)及SDS-PAGE雙嚮凝膠電泳分離蛋白質,攷馬斯亮藍染色,圖像掃描,PDQuest軟件分析圖像,篩選齣差異錶達蛋白質點.再從凝膠上切割差異蛋白質點,胰酶消化,應用基質輔助激光解吸/電離飛行時間質譜分析,得到肽質量指紋圖,再利用Mascot軟件搜索數據庫,鑒定蛋白質.[結果]建立瞭傢兔外週血中性粒細胞蛋白質2-DE圖譜.A、B組平均蛋白質點數分彆為(759±20)箇、(749±27)箇,平均匹配率分彆為93%、91%.兩組間篩選齣19箇差異蛋白質點,鑒定瞭其中8箇,包括7種蛋白質.[結論]傢兔嚴重燙傷後外週血中性粒細胞蛋白質組髮生改變,錶達變化的蛋白質包括蛋白質二硫鍵異構酶、β-肌動蛋白、膜聯蛋白Ⅰ、巰基特異性抗氧化蛋白等,功能涉及細胞內酶活性、細胞能動功能及可變形性、炎癥、代謝、抗氧化能力、細胞凋亡等,這些蛋白質與嚴重燒傷後中性粒細胞功能改變有關.
[목적]연구엄중탕상대가토외주혈중성립세포단백질조적영향.[방법]12지가토분위A、B량조(매조6지),A조위대조조(가탕처리)、B조위엄중탕상조(30%TBSA,Ⅲ도).A조가탕、B조탕상후24h경경동맥채혈분리중성립세포.렬해세포,제취단백질.이용고상pH제도효조(240mm×3mm×0.5mm,pH 3~10)급SDS-PAGE쌍향응효전영분리단백질,고마사량람염색,도상소묘,PDQuest연건분석도상,사선출차이표체단백질점.재종응효상절할차이단백질점,이매소화,응용기질보조격광해흡/전리비행시간질보분석,득도태질량지문도,재이용Mascot연건수색수거고,감정단백질.[결과]건립료가토외주혈중성립세포단백질2-DE도보.A、B조평균단백질점수분별위(759±20)개、(749±27)개,평균필배솔분별위93%、91%.량조간사선출19개차이단백질점,감정료기중8개,포괄7충단백질.[결론]가토엄중탕상후외주혈중성립세포단백질조발생개변,표체변화적단백질포괄단백질이류건이구매、β-기동단백、막련단백Ⅰ、구기특이성항양화단백등,공능섭급세포내매활성、세포능동공능급가변형성、염증、대사、항양화능력、세포조망등,저사단백질여엄중소상후중성립세포공능개변유관.