新疆农业大学学报
新疆農業大學學報
신강농업대학학보
JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2010年
1期
42-46
,共5页
张伟%马伟%王传锋%薛英%贺笋%吴星星%冉多良
張偉%馬偉%王傳鋒%薛英%賀筍%吳星星%冉多良
장위%마위%왕전봉%설영%하순%오성성%염다량
猪Ⅱ型圆环病毒%基因组%克隆%序列分析
豬Ⅱ型圓環病毒%基因組%剋隆%序列分析
저Ⅱ형원배병독%기인조%극륭%서렬분석
根据GenBank中已发表的猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)全基因组序列,设计合成了2对特异性引物.将PCV2新疆分离株(PCV2-XJ)用PK15细胞培养数代,从细胞培养物中提取病毒总DNA,并取其作为模板,PCR扩增出病毒全基因和结构基因(ORF2).将PCR回收产物克隆到pMD18-T载体,成功构建了重组质粒pMD18-T-PCV2和pMD18-T-ORF2,并对筛选出的阳性质粒进行测序.应用序列分析软件对测序结果分析可知,克隆得到的PCV2-XJ基因组全长1 768 bp.通过序列分析结果显示,PCV2-XJ与国内外PCV1、PCV2参考毒株的核苷酸同源性分别为99.5%～99.7%和68.7%;与HuB08(FJ041151)参考株核苷酸同源性最高(99.7%).PCV2-XJ株ORF2基因与参考株核苷酸和氨基酸同源性分别高达99.3%和98.8%.
根據GenBank中已髮錶的豬Ⅱ型圓環病毒(PCV2)全基因組序列,設計閤成瞭2對特異性引物.將PCV2新疆分離株(PCV2-XJ)用PK15細胞培養數代,從細胞培養物中提取病毒總DNA,併取其作為模闆,PCR擴增齣病毒全基因和結構基因(ORF2).將PCR迴收產物剋隆到pMD18-T載體,成功構建瞭重組質粒pMD18-T-PCV2和pMD18-T-ORF2,併對篩選齣的暘性質粒進行測序.應用序列分析軟件對測序結果分析可知,剋隆得到的PCV2-XJ基因組全長1 768 bp.通過序列分析結果顯示,PCV2-XJ與國內外PCV1、PCV2參攷毒株的覈苷痠同源性分彆為99.5%～99.7%和68.7%;與HuB08(FJ041151)參攷株覈苷痠同源性最高(99.7%).PCV2-XJ株ORF2基因與參攷株覈苷痠和氨基痠同源性分彆高達99.3%和98.8%.
근거GenBank중이발표적저Ⅱ형원배병독(PCV2)전기인조서렬,설계합성료2대특이성인물.장PCV2신강분리주(PCV2-XJ)용PK15세포배양수대,종세포배양물중제취병독총DNA,병취기작위모판,PCR확증출병독전기인화결구기인(ORF2).장PCR회수산물극륭도pMD18-T재체,성공구건료중조질립pMD18-T-PCV2화pMD18-T-ORF2,병대사선출적양성질립진행측서.응용서렬분석연건대측서결과분석가지,극륭득도적PCV2-XJ기인조전장1 768 bp.통과서렬분석결과현시,PCV2-XJ여국내외PCV1、PCV2삼고독주적핵감산동원성분별위99.5%～99.7%화68.7%;여HuB08(FJ041151)삼고주핵감산동원성최고(99.7%).PCV2-XJ주ORF2기인여삼고주핵감산화안기산동원성분별고체99.3%화98.8%.
