CAJ | 학술논문

[目的]建立并优化乙烯利调控甘蔗基因差异表达的cDNA-AFLP分析体系和银染体系,利用该技术对乙烯利处理的甘蔗进行基因差异表达研究,探讨乙烯利调控甘蔗生长的分子机理.[方法]以甘蔗品种ROC16为材料,在甘蔗生长40d左右时,叶面喷施200 mg/L乙烯利溶液(对照为清水)0、3、6、12、24、48 h后,分别取甘蔗叶片提取总RNA,建立cDNA-AFLP分析体系和银染体系;利用193对引物组合对乙烯利处理和对照的甘蔗叶片RNA混合池的样品进行差异表达分析,对部分差异转录片段进行回收、克隆、反向Northem杂交验证、序列分析和功能分析等.[结果]经eDNA-AFLP体系反应扩增,乙烯利处理和对照每个样品的扩增条带数均在35-80之间,处理和对照之间条带多态性明显.在反向Northem杂交验证分析中,24个测试样品中有11个无差异,假阳性率高达46%;在乙烯利作用下,甘蔗的CHI、GST、ARP、LHC、核结合蛋白基因以及一批未知基因差异表达,其中CHI、CST、LHC和核结合蛋白基因是与促进植物的抗病抗逆、提高光合作用等密切相关的因子.[结论]cDNA-AFLP技术是研究乙烯利诱导甘蔗相关基因差异表达和调控的一种较有效方法,具有可行性.乙烯利可能是通过调控甘蔗体内CST,CHI、ARF和LHC等基因的表达,从而表现出促进甘蔗生长、提高光合作用、增强抗病抗逆性等生理效应.
[목적]건립병우화을희리조공감자기인차이표체적cDNA-AFLP분석체계화은염체계,이용해기술대을희리처리적감자진행기인차이표체연구,탐토을희리조공감자생장적분자궤리.[방법]이감자품충ROC16위재료,재감자생장40d좌우시,협면분시200 mg/L을희리용액(대조위청수)0、3、6、12、24、48 h후,분별취감자협편제취총RNA,건립cDNA-AFLP분석체계화은염체계;이용193대인물조합대을희리처리화대조적감자협편RNA혼합지적양품진행차이표체분석,대부분차이전록편단진행회수、극륭、반향Northem잡교험증、서렬분석화공능분석등.[결과]경eDNA-AFLP체계반응확증,을희리처리화대조매개양품적확증조대수균재35-80지간,처리화대조지간조대다태성명현.재반향Northem잡교험증분석중,24개측시양품중유11개무차이,가양성솔고체46%;재을희리작용하,감자적CHI、GST、ARP、LHC、핵결합단백기인이급일비미지기인차이표체,기중CHI、CST、LHC화핵결합단백기인시여촉진식물적항병항역、제고광합작용등밀절상관적인자.[결론]cDNA-AFLP기술시연구을희리유도감자상관기인차이표체화조공적일충교유효방법,구유가행성.을희리가능시통과조공감자체내CST,CHI、ARF화LHC등기인적표체,종이표현출촉진감자생장、제고광합작용、증강항병항역성등생리효응.