热带亚热带植物学报
熱帶亞熱帶植物學報
열대아열대식물학보
JOURNAL OF TROPICAL AND SUBTROPICAL BOTANY
2011年
2期
142-148
,共7页
高世武%郭晋隆%许莉萍%陈如凯%傅华英
高世武%郭晉隆%許莉萍%陳如凱%傅華英
고세무%곽진륭%허리평%진여개%부화영
甘蔗%cry1Ac基因%bar基因%遗传转化%基因枪%抗螟虫
甘蔗%cry1Ac基因%bar基因%遺傳轉化%基因鎗%抗螟蟲
감자%cry1Ac기인%bar기인%유전전화%기인창%항명충
根据定向克隆原则,以pGreenⅡ0229为载体骨架,cry1Ac为目的基因,bar为筛选标记基因,构建了大小为8602 bp的植物表达载体pUBCG0229-cry1Ac.酶切结果表明,构建的载体pUBCG0229-cry1Ac结构完全正确.用基因枪轰击法将pUBCG0229-cry1Ac质粒DNA转化甘蔗(Saccharum Complex)品种福农95-1702和桂糖94-119的胚性愈伤组织,使用PPT(phosphinothric in )对轰击后的材料进行继代、分化和生根筛选,移栽成活后使用Basta溶液喷洒进行初步筛选,共获得86株抗性植株,通过PCR检测、Dot-Southern检测及PCR产物测序,证明已将cry1Ac基因整合到其中22株甘蔗基因组中.
根據定嚮剋隆原則,以pGreenⅡ0229為載體骨架,cry1Ac為目的基因,bar為篩選標記基因,構建瞭大小為8602 bp的植物錶達載體pUBCG0229-cry1Ac.酶切結果錶明,構建的載體pUBCG0229-cry1Ac結構完全正確.用基因鎗轟擊法將pUBCG0229-cry1Ac質粒DNA轉化甘蔗(Saccharum Complex)品種福農95-1702和桂糖94-119的胚性愈傷組織,使用PPT(phosphinothric in )對轟擊後的材料進行繼代、分化和生根篩選,移栽成活後使用Basta溶液噴灑進行初步篩選,共穫得86株抗性植株,通過PCR檢測、Dot-Southern檢測及PCR產物測序,證明已將cry1Ac基因整閤到其中22株甘蔗基因組中.
근거정향극륭원칙,이pGreenⅡ0229위재체골가,cry1Ac위목적기인,bar위사선표기기인,구건료대소위8602 bp적식물표체재체pUBCG0229-cry1Ac.매절결과표명,구건적재체pUBCG0229-cry1Ac결구완전정학.용기인창굉격법장pUBCG0229-cry1Ac질립DNA전화감자(Saccharum Complex)품충복농95-1702화계당94-119적배성유상조직,사용PPT(phosphinothric in )대굉격후적재료진행계대、분화화생근사선,이재성활후사용Basta용액분쇄진행초보사선,공획득86주항성식주,통과PCR검측、Dot-Southern검측급PCR산물측서,증명이장cry1Ac기인정합도기중22주감자기인조중.
