中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
2期
125-131
,共7页
吴莹%金叶智%张舒%闫玥捷%路广琳%郝钰
吳瑩%金葉智%張舒%閆玥捷%路廣琳%郝鈺
오형%금협지%장서%염모첩%로엄림%학옥
小檗碱%流感病毒%炎性细胞因子%TLR7%MyD88%NF-κB P65
小檗堿%流感病毒%炎性細胞因子%TLR7%MyD88%NF-κB P65
소벽감%류감병독%염성세포인자%TLR7%MyD88%NF-κB P65
目的:探讨小檗碱对流感病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后TNF-α、MCP-1转录、表达的影响及与TLR7介导的MyD88依赖性信号通路的关系.方法:流感病毒感染NR8383细胞1 小时后,加入含小檗碱的培养基(终浓度5 μg/ml),药物作用后6、12、24小时,ELISA检测细胞上清中TNF-α、MCP-1的含量;24小时,Real time PCR检测细胞内TNF-α、MCP-1的mRNA水平,RT-PCR检测TLR7、MyD88、NF-κB P65 mRNA水平;4、6、24小时,免疫组化法检测NF-κB P65核转位情况,并做半定量分析;24小时,Western blot检测NF-κB P65表达水平.结果:小檗碱抑制了流感病毒感染NR8383细胞后TNF-α、MCP-1的转录和表达(P＜0.05),降低了TLR7、MyD88、NF-κB P65 mRNA水平(P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01),抑制了流感病毒感染后NF-κB P65的核转位及表达(P＜0.01).结论:小檗碱通过抑制TLR7介导的MyD88依赖性信号通路,抑制了NF-κB P65的核转位及表达,从而减少流感病毒感染巨噬细胞后炎性细胞因子TNF-α、MCP-1的产生,在流感治疗中发挥抗炎作用.
目的:探討小檗堿對流感病毒感染大鼠肺泡巨噬細胞(NR8383)後TNF-α、MCP-1轉錄、錶達的影響及與TLR7介導的MyD88依賴性信號通路的關繫.方法:流感病毒感染NR8383細胞1 小時後,加入含小檗堿的培養基(終濃度5 μg/ml),藥物作用後6、12、24小時,ELISA檢測細胞上清中TNF-α、MCP-1的含量;24小時,Real time PCR檢測細胞內TNF-α、MCP-1的mRNA水平,RT-PCR檢測TLR7、MyD88、NF-κB P65 mRNA水平;4、6、24小時,免疫組化法檢測NF-κB P65覈轉位情況,併做半定量分析;24小時,Western blot檢測NF-κB P65錶達水平.結果:小檗堿抑製瞭流感病毒感染NR8383細胞後TNF-α、MCP-1的轉錄和錶達(P＜0.05),降低瞭TLR7、MyD88、NF-κB P65 mRNA水平(P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01),抑製瞭流感病毒感染後NF-κB P65的覈轉位及錶達(P＜0.01).結論:小檗堿通過抑製TLR7介導的MyD88依賴性信號通路,抑製瞭NF-κB P65的覈轉位及錶達,從而減少流感病毒感染巨噬細胞後炎性細胞因子TNF-α、MCP-1的產生,在流感治療中髮揮抗炎作用.
목적:탐토소벽감대류감병독감염대서폐포거서세포(NR8383)후TNF-α、MCP-1전록、표체적영향급여TLR7개도적MyD88의뢰성신호통로적관계.방법:류감병독감염NR8383세포1 소시후,가입함소벽감적배양기(종농도5 μg/ml),약물작용후6、12、24소시,ELISA검측세포상청중TNF-α、MCP-1적함량;24소시,Real time PCR검측세포내TNF-α、MCP-1적mRNA수평,RT-PCR검측TLR7、MyD88、NF-κB P65 mRNA수평;4、6、24소시,면역조화법검측NF-κB P65핵전위정황,병주반정량분석;24소시,Western blot검측NF-κB P65표체수평.결과:소벽감억제료류감병독감염NR8383세포후TNF-α、MCP-1적전록화표체(P＜0.05),강저료TLR7、MyD88、NF-κB P65 mRNA수평(P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01),억제료류감병독감염후NF-κB P65적핵전위급표체(P＜0.01).결론:소벽감통과억제TLR7개도적MyD88의뢰성신호통로,억제료NF-κB P65적핵전위급표체,종이감소류감병독감염거서세포후염성세포인자TNF-α、MCP-1적산생,재류감치료중발휘항염작용.
