草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2012年
3期
106-116
,共11页
牛继平%张金文%王旺田%王蒂%陆艳梅%张俊莲
牛繼平%張金文%王旺田%王蒂%陸豔梅%張俊蓮
우계평%장금문%왕왕전%왕체%륙염매%장준련
马铃薯%糖苷生物碱%茄啶糖苷转移酶%基因克隆%生物信息学分析
馬鈴藷%糖苷生物堿%茄啶糖苷轉移酶%基因剋隆%生物信息學分析
마령서%당감생물감%가정당감전이매%기인극륭%생물신식학분석
糖苷生物碱(SGAs)是一类存在于茄科植物和百合科植物的重要次生代谢物,与植物抗逆性和产品品质有密切关系,同时在医药上具有广泛的药理学活性.茄啶:糖基转移酶(SGT)为SGAs合成代谢途径末端关键酶,研究其基因结构及其编码的酶蛋白特性,对于调控植物体内SGAs合成及其通过微生物发酵生产SGTs有重要的作用和意义.通过生物信息学分析方法预测3个糖基转移酶cDNA编码的酶蛋白结构和特性.以马铃薯块茎表皮总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出3个糖基转移酶(SGT1、SGT2和SGT3)基因片段并克隆到pMDR 19-T载体.阳性克隆经PCR鉴定后进行测序,序列分析结果表明,克隆到的sgt1、sgt2和sgt3三个同源的序列片段(1 467~1 518 bp),编码488~505个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的高等植物SGT酶基因核苷酸序列(U82367.2、DQ 218276.1和DQ 266437)的同源性均在99.12%以上,氨基酸同源性达到99%以上,3个基因都具有UDPG糖基转移酶保守结构域及许多重要功能位点;PI为5.52~5.62.三级结构预测表明,该氨基酸同糖基转移酶单体结构模型相似,都为糖基转移酶家族成员,具有合成类固醇糖苷生物碱的功能,基因序列已注册到GenBank,序列注册号分别为:sgtl,JN695005;sgt2,JN695006;sgt3,HM188447.
糖苷生物堿(SGAs)是一類存在于茄科植物和百閤科植物的重要次生代謝物,與植物抗逆性和產品品質有密切關繫,同時在醫藥上具有廣汎的藥理學活性.茄啶:糖基轉移酶(SGT)為SGAs閤成代謝途徑末耑關鍵酶,研究其基因結構及其編碼的酶蛋白特性,對于調控植物體內SGAs閤成及其通過微生物髮酵生產SGTs有重要的作用和意義.通過生物信息學分析方法預測3箇糖基轉移酶cDNA編碼的酶蛋白結構和特性.以馬鈴藷塊莖錶皮總RNA為模闆,採用RT-PCR的方法擴增齣3箇糖基轉移酶(SGT1、SGT2和SGT3)基因片段併剋隆到pMDR 19-T載體.暘性剋隆經PCR鑒定後進行測序,序列分析結果錶明,剋隆到的sgt1、sgt2和sgt3三箇同源的序列片段(1 467~1 518 bp),編碼488~505箇氨基痠;所得序列與GenBank中註冊的高等植物SGT酶基因覈苷痠序列(U82367.2、DQ 218276.1和DQ 266437)的同源性均在99.12%以上,氨基痠同源性達到99%以上,3箇基因都具有UDPG糖基轉移酶保守結構域及許多重要功能位點;PI為5.52~5.62.三級結構預測錶明,該氨基痠同糖基轉移酶單體結構模型相似,都為糖基轉移酶傢族成員,具有閤成類固醇糖苷生物堿的功能,基因序列已註冊到GenBank,序列註冊號分彆為:sgtl,JN695005;sgt2,JN695006;sgt3,HM188447.
당감생물감(SGAs)시일류존재우가과식물화백합과식물적중요차생대사물,여식물항역성화산품품질유밀절관계,동시재의약상구유엄범적약이학활성.가정:당기전이매(SGT)위SGAs합성대사도경말단관건매,연구기기인결구급기편마적매단백특성,대우조공식물체내SGAs합성급기통과미생물발효생산SGTs유중요적작용화의의.통과생물신식학분석방법예측3개당기전이매cDNA편마적매단백결구화특성.이마령서괴경표피총RNA위모판,채용RT-PCR적방법확증출3개당기전이매(SGT1、SGT2화SGT3)기인편단병극륭도pMDR 19-T재체.양성극륭경PCR감정후진행측서,서렬분석결과표명,극륭도적sgt1、sgt2화sgt3삼개동원적서렬편단(1 467~1 518 bp),편마488~505개안기산;소득서렬여GenBank중주책적고등식물SGT매기인핵감산서렬(U82367.2、DQ 218276.1화DQ 266437)적동원성균재99.12%이상,안기산동원성체도99%이상,3개기인도구유UDPG당기전이매보수결구역급허다중요공능위점;PI위5.52~5.62.삼급결구예측표명,해안기산동당기전이매단체결구모형상사,도위당기전이매가족성원,구유합성류고순당감생물감적공능,기인서렬이주책도GenBank,서렬주책호분별위:sgtl,JN695005;sgt2,JN695006;sgt3,HM188447.