人睾丸特异表达基因TDRG1 shRNA表达载体的构建及其表达
인고환특이표체기인TDRG1 shRNA표체재체적구건급기표체
Construction of TDRG1 shRNA expression vector and interfering effect of TDRG1 shRNA expression vector on NTERA-2 cells
  • 万方数据
    中南大学学报（医学版） 중남대학학보（의학판）
    JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
    2012年 10期 979-982 ,共4页

    彭圣林%阳建福%陈厚仰%郭小亮%李东杰%周华波%甘宇%蒋先镇%汤育新

    팽골림%양건복%진후앙%곽소량%리동걸%주화파%감우%장선진%탕육신

    睾丸基因%TDRG1%RNAi%shRNA%NTERA-2细胞 睪汍基因%TDRG1%RNAi%shRNA%NTERA-2細胞
    고환기인%TDRG1%RNAi%shRNA%NTERA-2세포
    目的:构建人睾丸基因TDRG1的shRNA表达质粒,并研究其在NTERA-2细胞中的表达.方法:设计合成有短发夹结构靶位TDRG1基因的寡核苷酸,经退火成双链,克隆至载体pGPU6/GFP/Neo中,构建TDRG1shRNA表达载体,得到重组质粒TDRG 1-shRNA486,TDRG 1-shRNA738,TDRG 1-shRNA921和一个阴性对照,使用LipofectamineTM 12000转染shRNA至NTERA-2细胞,应用RT-PCR法检测转染后NTERA-2细胞TDRG1 mRNA的表达水平.结果:经测序证实,插入的DNA片段的序列与设计序列完全一致.同时筛选到转染TDRG 1-shRNA486的NTERA-2细胞TDRG1基因的mRNA表达水平明显抑制.结论:成功构建了人类睾丸基因TDRG1的shRNA表达载体,TDRG 1-shRNA在NTERA-2细胞内成功表达.
    목적:구건인고환기인TDRG1적shRNA표체질립,병연구기재NTERA-2세포중적표체.방법:설계합성유단발협결구파위TDRG1기인적과핵감산,경퇴화성쌍련,극륭지재체pGPU6/GFP/Neo중,구건TDRG1shRNA표체재체,득도중조질립TDRG 1-shRNA486,TDRG 1-shRNA738,TDRG 1-shRNA921화일개음성대조,사용LipofectamineTM 12000전염shRNA지NTERA-2세포,응용RT-PCR법검측전염후NTERA-2세포TDRG1 mRNA적표체수평.결과:경측서증실,삽입적DNA편단적서렬여설계서렬완전일치.동시사선도전염TDRG 1-shRNA486적NTERA-2세포TDRG1기인적mRNA표체수평명현억제.결론:성공구건료인류고환기인TDRG1적shRNA표체재체,TDRG 1-shRNA재NTERA-2세포내성공표체.
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