生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
2期
185-189
,共5页
袁静%张振中%杨巍%陈秀珠%还连栋
袁靜%張振中%楊巍%陳秀珠%還連棟
원정%장진중%양외%진수주%환련동
NisinZ%定点突变%稳定性
NisinZ%定點突變%穩定性
NisinZ%정점돌변%은정성
以本实验室构建的含nisZ基因的质粒pHJ201为模板,采用定点突变技术将乳链菌肽Z分子中B环第8位Thr突变为Ser(T8S)、将第2位Dhb突变为Dha和第31位His突变为Lys(T2S/H31K)以及将第27位Asn突变为Lys和第31位His突变为Lys(N27K/H31K),以pMG36e为载体,电击转化乳酸乳球菌(L.lactis)NZ9800进行表达.对表达产物性质的研究结果表明,3个突变体的抑菌谱和溶解度未发生变化,其抑菌活性略有下降,但它们的稳定性表现各不相同:N27K/H31K的稳定性与NisinZ几乎一致,而T8S和T2S/H31K的稳定性有明显提高,在pH9条件下100℃加热5min仍不丧失抑菌活性.
以本實驗室構建的含nisZ基因的質粒pHJ201為模闆,採用定點突變技術將乳鏈菌肽Z分子中B環第8位Thr突變為Ser(T8S)、將第2位Dhb突變為Dha和第31位His突變為Lys(T2S/H31K)以及將第27位Asn突變為Lys和第31位His突變為Lys(N27K/H31K),以pMG36e為載體,電擊轉化乳痠乳毬菌(L.lactis)NZ9800進行錶達.對錶達產物性質的研究結果錶明,3箇突變體的抑菌譜和溶解度未髮生變化,其抑菌活性略有下降,但它們的穩定性錶現各不相同:N27K/H31K的穩定性與NisinZ幾乎一緻,而T8S和T2S/H31K的穩定性有明顯提高,在pH9條件下100℃加熱5min仍不喪失抑菌活性.
이본실험실구건적함nisZ기인적질립pHJ201위모판,채용정점돌변기술장유련균태Z분자중B배제8위Thr돌변위Ser(T8S)、장제2위Dhb돌변위Dha화제31위His돌변위Lys(T2S/H31K)이급장제27위Asn돌변위Lys화제31위His돌변위Lys(N27K/H31K),이pMG36e위재체,전격전화유산유구균(L.lactis)NZ9800진행표체.대표체산물성질적연구결과표명,3개돌변체적억균보화용해도미발생변화,기억균활성략유하강,단타문적은정성표현각불상동:N27K/H31K적은정성여NisinZ궤호일치,이T8S화T2S/H31K적은정성유명현제고,재pH9조건하100℃가열5min잉불상실억균활성.
