纤溶酶原饼环区5蛋白重组大肠杆菌高效表达体系的建立
섬용매원병배구5단백중조대장간균고효표체체계적건립
Construction of High Expression System of Human Plasminogen Kringle 5(hPK-5) Protein in E.coli
  • 万方数据
    中国生物制品学杂志 중국생물제품학잡지
    CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
    2004年 4期 207-210 ,共4页

    陈显久%王惠珍%于保锋%程牛亮%解军%胥显民%张悦红%郝一彬%牛勃

    진현구%왕혜진%우보봉%정우량%해군%서현민%장열홍%학일빈%우발

    纤溶酶原%hPK-5%克隆%表达 纖溶酶原%hPK-5%剋隆%錶達
    섬용매원%hPK-5%극륭%표체
    目的建立纤溶酶原饼环区5(Human plasminogen kringle 5,hPK-5)蛋白重组大肠杆菌高效表达体系,为高密度发酵创造条件.方法观察一级、二级种子的生长状态,比较表达hPK-5蛋白的4种重组工程菌株在相同条件下的表达情况,选出首选发酵种子;对其培养时间、诱导时间、培养基种类、pH等条件进行优化;并用凝胶成像分析系统对SDS-PAGE结果进行分析.结果经过筛选,JM109/pBV220/hPK-5(简称JP5)是获取hPK-5蛋白的首选工程菌株,其最佳表达条件是LB培养基(pH7.4、溶解氧充足)、30℃培养3h、42℃诱导6 h.在此条件下,JP5表达目的蛋白占菌体总蛋白的38%左右.结论为高密度发酵获取hPK-5蛋白奠定了实验基础.
    목적건립섬용매원병배구5(Human plasminogen kringle 5,hPK-5)단백중조대장간균고효표체체계,위고밀도발효창조조건.방법관찰일급、이급충자적생장상태,비교표체hPK-5단백적4충중조공정균주재상동조건하적표체정황,선출수선발효충자;대기배양시간、유도시간、배양기충류、pH등조건진행우화;병용응효성상분석계통대SDS-PAGE결과진행분석.결과경과사선,JM109/pBV220/hPK-5(간칭JP5)시획취hPK-5단백적수선공정균주,기최가표체조건시LB배양기(pH7.4、용해양충족)、30℃배양3h、42℃유도6 h.재차조건하,JP5표체목적단백점균체총단백적38%좌우.결론위고밀도발효획취hPK-5단백전정료실험기출.
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