菌物学报
菌物學報
균물학보
MYCOSYSTEMA
2006年
4期
573-578
,共6页
郝帅%郭建强%李运敏%岳丽丽%矫庆华
郝帥%郭建彊%李運敏%嶽麗麗%矯慶華
학수%곽건강%리운민%악려려%교경화
Pyrococcus furiosus%AOX1启动子%MOX启动子%α-因子信号肽
Pyrococcus furiosus%AOX1啟動子%MOX啟動子%α-因子信號肽
Pyrococcus furiosus%AOX1계동자%MOX계동자%α-인자신호태
利用毕赤酵母的质粒载体pPIC9K将极端耐热古菌Pyrococcus furiosus的超耐热酸性α-淀粉酶 (Amy) 基因转化到多型汉逊酵母HP-6中,获得重组汉逊酵母.经过甲醇进行诱导,表达产物的酶活性检测和SDS-PAGE电泳,证明α-淀粉酶(Amy)在多型汉逊酵母中利用AOX1启动子和α-因子信号肽有效表达并分泌到胞外.该酶的最适反应温度为90～100℃,最适作用pH为4.0～5.0,较之重组毕赤酵母的最适作用pH还低0.5.此外与毕赤酵母的重组蛋白相比,重组汉逊酵母α-淀粉酶不仅菌株筛选简便、周期短,而且具有更容易筛选到高拷贝转化子以及适用于大规模工业发酵等优点.
利用畢赤酵母的質粒載體pPIC9K將極耑耐熱古菌Pyrococcus furiosus的超耐熱痠性α-澱粉酶 (Amy) 基因轉化到多型漢遜酵母HP-6中,穫得重組漢遜酵母.經過甲醇進行誘導,錶達產物的酶活性檢測和SDS-PAGE電泳,證明α-澱粉酶(Amy)在多型漢遜酵母中利用AOX1啟動子和α-因子信號肽有效錶達併分泌到胞外.該酶的最適反應溫度為90～100℃,最適作用pH為4.0～5.0,較之重組畢赤酵母的最適作用pH還低0.5.此外與畢赤酵母的重組蛋白相比,重組漢遜酵母α-澱粉酶不僅菌株篩選簡便、週期短,而且具有更容易篩選到高拷貝轉化子以及適用于大規模工業髮酵等優點.
이용필적효모적질립재체pPIC9K장겁단내열고균Pyrococcus furiosus적초내열산성α-정분매 (Amy) 기인전화도다형한손효모HP-6중,획득중조한손효모.경과갑순진행유도,표체산물적매활성검측화SDS-PAGE전영,증명α-정분매(Amy)재다형한손효모중이용AOX1계동자화α-인자신호태유효표체병분비도포외.해매적최괄반응온도위90～100℃,최괄작용pH위4.0～5.0,교지중조필적효모적최괄작용pH환저0.5.차외여필적효모적중조단백상비,중조한손효모α-정분매불부균주사선간편、주기단,이차구유경용역사선도고고패전화자이급괄용우대규모공업발효등우점.
