临床外科杂志
臨床外科雜誌
림상외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL SURGERY
2007年
6期
407-409
,共3页
顾昱%吴相柏%李拥军%尹宜发%李欣%邹立勇
顧昱%吳相柏%李擁軍%尹宜髮%李訢%鄒立勇
고욱%오상백%리옹군%윤의발%리흔%추립용
短发卡状RNA%RNA干扰%表皮生长因子受体%结肠癌
短髮卡狀RNA%RNA榦擾%錶皮生長因子受體%結腸癌
단발잡상RNA%RNA간우%표피생장인자수체%결장암
目的 体外构建编码人类表皮生长因子受体(EGFR)的短发卡状RNA(shRNA)的质粒表达载体,观察其对结肠癌LoVo细胞EGFR的特异性抑制作用以及对细胞凋亡的影响.方法 体外合成EGFR的DNA模板引物和Pgenesil-1质粒构建编码shRNA的表达载体.应用脂质体Lipofectamine 2000转染人结肠癌LoVo细胞,转染成功后以G418筛选4周,实时荧光定量RT-PCR(real time RT-PCR)和Western-blot检测EGFR的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 成功的构建了针对EGFR的质粒表达载体.质粒载体成功转染后,EGFR mRNA表达下降了(81.3±2.8)%,蛋白表达下降了(73.4±2.3)%,细胞凋亡增加了(10.1±0.4)%,和对照质粒载体比较差异有统计学意义.结论 我们构建的针对EGFR的质粒表达载体可以显著抑制其在人结肠癌LoVo细胞的表达,诱导细胞凋亡,为结肠癌的基因治疗提供了新的思路.
目的 體外構建編碼人類錶皮生長因子受體(EGFR)的短髮卡狀RNA(shRNA)的質粒錶達載體,觀察其對結腸癌LoVo細胞EGFR的特異性抑製作用以及對細胞凋亡的影響.方法 體外閤成EGFR的DNA模闆引物和Pgenesil-1質粒構建編碼shRNA的錶達載體.應用脂質體Lipofectamine 2000轉染人結腸癌LoVo細胞,轉染成功後以G418篩選4週,實時熒光定量RT-PCR(real time RT-PCR)和Western-blot檢測EGFR的錶達,流式細胞儀檢測細胞凋亡.結果 成功的構建瞭針對EGFR的質粒錶達載體.質粒載體成功轉染後,EGFR mRNA錶達下降瞭(81.3±2.8)%,蛋白錶達下降瞭(73.4±2.3)%,細胞凋亡增加瞭(10.1±0.4)%,和對照質粒載體比較差異有統計學意義.結論 我們構建的針對EGFR的質粒錶達載體可以顯著抑製其在人結腸癌LoVo細胞的錶達,誘導細胞凋亡,為結腸癌的基因治療提供瞭新的思路.
목적 체외구건편마인류표피생장인자수체(EGFR)적단발잡상RNA(shRNA)적질립표체재체,관찰기대결장암LoVo세포EGFR적특이성억제작용이급대세포조망적영향.방법 체외합성EGFR적DNA모판인물화Pgenesil-1질립구건편마shRNA적표체재체.응용지질체Lipofectamine 2000전염인결장암LoVo세포,전염성공후이G418사선4주,실시형광정량RT-PCR(real time RT-PCR)화Western-blot검측EGFR적표체,류식세포의검측세포조망.결과 성공적구건료침대EGFR적질립표체재체.질립재체성공전염후,EGFR mRNA표체하강료(81.3±2.8)%,단백표체하강료(73.4±2.3)%,세포조망증가료(10.1±0.4)%,화대조질립재체비교차이유통계학의의.결론 아문구건적침대EGFR적질립표체재체가이현저억제기재인결장암LoVo세포적표체,유도세포조망,위결장암적기인치료제공료신적사로.
