河南农业大学学报
河南農業大學學報
하남농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS HENANENSIS
2009年
3期
287-291,301
,共6页
李明凤%魏战勇%郭显坡%贾艳艳%陈红英%王学兵%崔保安
李明鳳%魏戰勇%郭顯坡%賈豔豔%陳紅英%王學兵%崔保安
리명봉%위전용%곽현파%가염염%진홍영%왕학병%최보안
猪伪狂犬病毒%SYBR-Green Ⅰ%实时荧光定量PCR%标准曲线
豬偽狂犬病毒%SYBR-Green Ⅰ%實時熒光定量PCR%標準麯線
저위광견병독%SYBR-Green Ⅰ%실시형광정량PCR%표준곡선
利用PCR技术扩增出猪伪狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,并克隆到pGEM T栽体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线.建立了猪伪狂犬病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.26×102拷贝·μL-1,与猪圆环病毒,猪细小病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪瘟病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对15份疑似病料进行了检测.发现均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出6份阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PRV感染的检测.
利用PCR技術擴增齣豬偽狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,併剋隆到pGEM T栽體上,純化的質粒作為PCR檢測的標準模闆,以10倍梯度稀釋質粒為標準模闆,進行SYBR Green Ⅰ熒光定量PCR擴增併製作標準麯線.建立瞭豬偽狂犬病毒的熒光定量PCR檢測方法.該方法檢測靈敏度可達1.26×102拷貝·μL-1,與豬圓環病毒,豬細小病毒,豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒,豬瘟病毒不髮生交扠反應,具有良好的特異性和重複性;對15份疑似病料進行瞭檢測.髮現均為熒光定量PCR暘性,而常規PCR隻能檢測齣6份暘性.結果錶明,建立的實時熒光定量PCR具有特異、敏感、快速、定量、重複性好等優點,可用于臨床PRV感染的檢測.
이용PCR기술확증출저위광견병독gH기인중187 bp적편단,병극륭도pGEM T재체상,순화적질립작위PCR검측적표준모판,이10배제도희석질립위표준모판,진행SYBR Green Ⅰ형광정량PCR확증병제작표준곡선.건립료저위광견병독적형광정량PCR검측방법.해방법검측령민도가체1.26×102고패·μL-1,여저원배병독,저세소병독,저번식여호흡종합정병독,저온병독불발생교차반응,구유량호적특이성화중복성;대15빈의사병료진행료검측.발현균위형광정량PCR양성,이상규PCR지능검측출6빈양성.결과표명,건립적실시형광정량PCR구유특이、민감、쾌속、정량、중복성호등우점,가용우림상PRV감염적검측.
