中国水稻科学
中國水稻科學
중국수도과학
CHINESE JOURNAL OF RICE SCIENCE
2012年
1期
9-15
,共7页
吕明芳%羊健%张恒木%陈剑平
呂明芳%羊健%張恆木%陳劍平
려명방%양건%장항목%진검평
水稻黑条矮缩病毒%非结构蛋白%原核表达
水稻黑條矮縮病毒%非結構蛋白%原覈錶達
수도흑조왜축병독%비결구단백%원핵표체
水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)基因组片段S7含有2个非重叠的阅读框,所编码的蛋白分别为p7a和p7b.根据RBSDV S7序列(EU111804)设计特异性引物分别扩增编码p7a和p7b蛋白的基因片段,并亚克隆至原核表达载体pET-32a(+)和pSBET上,再以大肠杆菌BL21( DE3) pLysS或BL21(DE3)pLysE为宿主菌进行高水平表达,利用纯化的蛋白免疫小鼠,制备了p7a和p7b蛋白的特异性抗血清.蛋白质印迹分析表明p7a和p7b蛋白均在水稻病株中表达,但p7a含量较为丰富,易于在病株中检测到,而p7b在病株中含量则很低；在病毒粒子中,两者均未检测到任何信号,表明两者均为RBSDV的非结构蛋白.
水稻黑條矮縮病毒(RBSDV)基因組片段S7含有2箇非重疊的閱讀框,所編碼的蛋白分彆為p7a和p7b.根據RBSDV S7序列(EU111804)設計特異性引物分彆擴增編碼p7a和p7b蛋白的基因片段,併亞剋隆至原覈錶達載體pET-32a(+)和pSBET上,再以大腸桿菌BL21( DE3) pLysS或BL21(DE3)pLysE為宿主菌進行高水平錶達,利用純化的蛋白免疫小鼠,製備瞭p7a和p7b蛋白的特異性抗血清.蛋白質印跡分析錶明p7a和p7b蛋白均在水稻病株中錶達,但p7a含量較為豐富,易于在病株中檢測到,而p7b在病株中含量則很低；在病毒粒子中,兩者均未檢測到任何信號,錶明兩者均為RBSDV的非結構蛋白.
수도흑조왜축병독(RBSDV)기인조편단S7함유2개비중첩적열독광,소편마적단백분별위p7a화p7b.근거RBSDV S7서렬(EU111804)설계특이성인물분별확증편마p7a화p7b단백적기인편단,병아극륭지원핵표체재체pET-32a(+)화pSBET상,재이대장간균BL21( DE3) pLysS혹BL21(DE3)pLysE위숙주균진행고수평표체,이용순화적단백면역소서,제비료p7a화p7b단백적특이성항혈청.단백질인적분석표명p7a화p7b단백균재수도병주중표체,단p7a함량교위봉부,역우재병주중검측도,이p7b재병주중함량칙흔저；재병독입자중,량자균미검측도임하신호,표명량자균위RBSDV적비결구단백.
