中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2007年
29期
2065-2068
,共4页
赵云山%徐迎新%张博峰%吴欣%刘巨超%张兰%唐利安%黄志强
趙雲山%徐迎新%張博峰%吳訢%劉巨超%張蘭%唐利安%黃誌彊
조운산%서영신%장박봉%오흔%류거초%장란%당리안%황지강
肝细胞%胶原Ⅰ型%皮下植入
肝細胞%膠原Ⅰ型%皮下植入
간세포%효원Ⅰ형%피하식입
目的 探讨肝细胞与液态Ⅰ型胶原复合构建可植入的工程化肝组织的可行性.方法 SD大鼠肝细胞与液态Ⅰ型胶原及DMEM复合,形成肝细胞/胶原凝胶复合物.该复合物被接种在培养板中培养,采用相差显微镜和HE染色方法对培养肝细胞形态特征进行观察,并采用MTT法和免疫组化染色方法分别对肝细胞的活性和功能进行检测.肝细胞/胶原复合物同时被植入皮下腔中观察肝细胞的分化及工程化肝组织的形成情况,采用HE染色和免疫组织化学染色方法对植入的工程化肝组织进行评价.结果 肝细胞与液态Ⅰ型胶原复合后形成凝胶状复合物,可见肝细胞均匀分布在整个复合物中,呈三维立体生长.在整个体外培养过程中,肝细胞始终保持圆形的形态;肝细胞在培养初期活性稍有下降,直至第7天时仍然保持活性的87%,之后随培养时间延长而活性逐渐降低.经过2周培养,肝细胞仍具有白蛋白的合成功能.皮下植入后1周,肝细胞/胶原复合物形成工程化灶性肝组织,免疫组化染色证实这种工程化的肝组织具有白蛋白的合成功能.结论 采用胶原凝胶作为肝细胞生长和分化的支架可在体内构建类肝样的工程化肝组织.这种可植入的工程化肝组织提供了一种基于肝细胞治疗的新途径,并有望用于损伤肝组织修复和重建.
目的 探討肝細胞與液態Ⅰ型膠原複閤構建可植入的工程化肝組織的可行性.方法 SD大鼠肝細胞與液態Ⅰ型膠原及DMEM複閤,形成肝細胞/膠原凝膠複閤物.該複閤物被接種在培養闆中培養,採用相差顯微鏡和HE染色方法對培養肝細胞形態特徵進行觀察,併採用MTT法和免疫組化染色方法分彆對肝細胞的活性和功能進行檢測.肝細胞/膠原複閤物同時被植入皮下腔中觀察肝細胞的分化及工程化肝組織的形成情況,採用HE染色和免疫組織化學染色方法對植入的工程化肝組織進行評價.結果 肝細胞與液態Ⅰ型膠原複閤後形成凝膠狀複閤物,可見肝細胞均勻分佈在整箇複閤物中,呈三維立體生長.在整箇體外培養過程中,肝細胞始終保持圓形的形態;肝細胞在培養初期活性稍有下降,直至第7天時仍然保持活性的87%,之後隨培養時間延長而活性逐漸降低.經過2週培養,肝細胞仍具有白蛋白的閤成功能.皮下植入後1週,肝細胞/膠原複閤物形成工程化竈性肝組織,免疫組化染色證實這種工程化的肝組織具有白蛋白的閤成功能.結論 採用膠原凝膠作為肝細胞生長和分化的支架可在體內構建類肝樣的工程化肝組織.這種可植入的工程化肝組織提供瞭一種基于肝細胞治療的新途徑,併有望用于損傷肝組織脩複和重建.
목적 탐토간세포여액태Ⅰ형효원복합구건가식입적공정화간조직적가행성.방법 SD대서간세포여액태Ⅰ형효원급DMEM복합,형성간세포/효원응효복합물.해복합물피접충재배양판중배양,채용상차현미경화HE염색방법대배양간세포형태특정진행관찰,병채용MTT법화면역조화염색방법분별대간세포적활성화공능진행검측.간세포/효원복합물동시피식입피하강중관찰간세포적분화급공정화간조직적형성정황,채용HE염색화면역조직화학염색방법대식입적공정화간조직진행평개.결과 간세포여액태Ⅰ형효원복합후형성응효상복합물,가견간세포균균분포재정개복합물중,정삼유입체생장.재정개체외배양과정중,간세포시종보지원형적형태;간세포재배양초기활성초유하강,직지제7천시잉연보지활성적87%,지후수배양시간연장이활성축점강저.경과2주배양,간세포잉구유백단백적합성공능.피하식입후1주,간세포/효원복합물형성공정화조성간조직,면역조화염색증실저충공정화적간조직구유백단백적합성공능.결론 채용효원응효작위간세포생장화분화적지가가재체내구건류간양적공정화간조직.저충가식입적공정화간조직제공료일충기우간세포치료적신도경,병유망용우손상간조직수복화중건.
