首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2006年
2期
150-154
,共5页
靖学芳%吕喆%李晨%刘振龙%孙明洁%高燕%安云庆
靖學芳%呂喆%李晨%劉振龍%孫明潔%高燕%安雲慶
정학방%려철%리신%류진룡%손명길%고연%안운경
BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白%CHO-K1细胞%耐药菌
BPIm23-Fcγ1重組抗菌蛋白%CHO-K1細胞%耐藥菌
BPIm23-Fcγ1중조항균단백%CHO-K1세포%내약균
目的在CHO细胞中表达功能性BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白,检测该种抗菌蛋白对临床常见耐药性革兰阴性菌(G-菌)(大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌)的抑杀作用.方法用pSNAV-signal-syn BPIm500-Fcγ1 700转染CHO-K1细胞,通过Dot blot筛选获得高表达BPIm23-Fcγ1目的蛋白的阳性细胞克隆,经PF-CHO培养基扩大培养,获得分泌表达的BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白.采用离子交换层析、Western blot和ELISA方法纯化、鉴定目的重组蛋白.采用微量细菌定量药敏试验法检测目的抗菌蛋白对耐药性大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌的抑杀作用.结果获得了高表达BPIm23-Fcγ1目的重组蛋白的阳性细胞克隆,目的蛋白表达量约为25～50 mg/L.目的蛋白经Western blot和ELISA方法检测证实确为BPIm23-Fcγ1重组蛋白.该重组抗菌蛋白对耐药和非耐药性大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌具有同等抑杀作用.结论获得了功能性BPIm23-Fcγ1重组抗菌蛋白,该重组蛋白(0.4 mg/L)能有效抑杀耐药性大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌.
目的在CHO細胞中錶達功能性BPIm23-Fcγ1重組抗菌蛋白,檢測該種抗菌蛋白對臨床常見耐藥性革蘭陰性菌(G-菌)(大腸埃希菌和肺炎剋雷伯桿菌)的抑殺作用.方法用pSNAV-signal-syn BPIm500-Fcγ1 700轉染CHO-K1細胞,通過Dot blot篩選穫得高錶達BPIm23-Fcγ1目的蛋白的暘性細胞剋隆,經PF-CHO培養基擴大培養,穫得分泌錶達的BPIm23-Fcγ1重組抗菌蛋白.採用離子交換層析、Western blot和ELISA方法純化、鑒定目的重組蛋白.採用微量細菌定量藥敏試驗法檢測目的抗菌蛋白對耐藥性大腸埃希菌和肺炎剋雷伯桿菌的抑殺作用.結果穫得瞭高錶達BPIm23-Fcγ1目的重組蛋白的暘性細胞剋隆,目的蛋白錶達量約為25～50 mg/L.目的蛋白經Western blot和ELISA方法檢測證實確為BPIm23-Fcγ1重組蛋白.該重組抗菌蛋白對耐藥和非耐藥性大腸埃希菌和肺炎剋雷伯桿菌具有同等抑殺作用.結論穫得瞭功能性BPIm23-Fcγ1重組抗菌蛋白,該重組蛋白(0.4 mg/L)能有效抑殺耐藥性大腸埃希菌和肺炎剋雷伯桿菌.
목적재CHO세포중표체공능성BPIm23-Fcγ1중조항균단백,검측해충항균단백대림상상견내약성혁란음성균(G-균)(대장애희균화폐염극뢰백간균)적억살작용.방법용pSNAV-signal-syn BPIm500-Fcγ1 700전염CHO-K1세포,통과Dot blot사선획득고표체BPIm23-Fcγ1목적단백적양성세포극륭,경PF-CHO배양기확대배양,획득분비표체적BPIm23-Fcγ1중조항균단백.채용리자교환층석、Western blot화ELISA방법순화、감정목적중조단백.채용미량세균정량약민시험법검측목적항균단백대내약성대장애희균화폐염극뢰백간균적억살작용.결과획득료고표체BPIm23-Fcγ1목적중조단백적양성세포극륭,목적단백표체량약위25～50 mg/L.목적단백경Western blot화ELISA방법검측증실학위BPIm23-Fcγ1중조단백.해중조항균단백대내약화비내약성대장애희균화폐염극뢰백간균구유동등억살작용.결론획득료공능성BPIm23-Fcγ1중조항균단백,해중조단백(0.4 mg/L)능유효억살내약성대장애희균화폐염극뢰백간균.
