临床外科杂志
臨床外科雜誌
림상외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL SURGERY
2008年
3期
173-175
,共3页
吉文伟%薛新波%郑建伟%陈堃%于愿%王从俊%胡回忆
吉文偉%薛新波%鄭建偉%陳堃%于願%王從俊%鬍迴憶
길문위%설신파%정건위%진곤%우원%왕종준%호회억
Ad.mda-7%HepG2%凋亡%Bcl-2家族蛋白
Ad.mda-7%HepG2%凋亡%Bcl-2傢族蛋白
Ad.mda-7%HepG2%조망%Bcl-2가족단백
目的 观察Bcl-2 家族蛋白在Ad.mda-7介导HepG2细胞凋亡中的变化,初步探讨Ad.mda-7 介导肝癌细胞的凋亡机制.方法 将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒转染HepG2和L02,通过四甲基偶氮哩蓝染色法(MTT)及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞HepG2和正常肝胚细胞L02的生长抑制和杀伤作用. Annexin V和PI 双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2家族蛋白的变化.结果 Ad.mda-7能明显抑制肝癌细胞HepG2的生长,但对正常肝胚细胞L02没有明显抑制增殖作用.Hoechst染色和流式细胞仪提示Ad.mda-7能明显诱导肝癌细胞HepG2细胞的凋亡,但对正常肝胚细胞L02没有明显毒副作用.Western blot说明抑制凋亡的蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达在HepG2明显下降,在L02中则没有变化; 而促凋亡蛋白Bax在HepG2和L02都升高.结论 Ad.mda-7转染HepG2后,促凋亡(Bax)与抑凋亡蛋白(Bcl-2和Bcl-xl)的比率发生改变,进而发生凋亡.
目的 觀察Bcl-2 傢族蛋白在Ad.mda-7介導HepG2細胞凋亡中的變化,初步探討Ad.mda-7 介導肝癌細胞的凋亡機製.方法 將攜帶人MDA-7/IL-24基因的腺病毒轉染HepG2和L02,通過四甲基偶氮哩藍染色法(MTT)及Hoechst染色觀察MDA-7/IL-24對肝癌細胞HepG2和正常肝胚細胞L02的生長抑製和殺傷作用. Annexin V和PI 雙染後流式細胞儀檢測細胞的凋亡.蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測Bcl-2傢族蛋白的變化.結果 Ad.mda-7能明顯抑製肝癌細胞HepG2的生長,但對正常肝胚細胞L02沒有明顯抑製增殖作用.Hoechst染色和流式細胞儀提示Ad.mda-7能明顯誘導肝癌細胞HepG2細胞的凋亡,但對正常肝胚細胞L02沒有明顯毒副作用.Western blot說明抑製凋亡的蛋白Bcl-2和Bcl-xl的錶達在HepG2明顯下降,在L02中則沒有變化; 而促凋亡蛋白Bax在HepG2和L02都升高.結論 Ad.mda-7轉染HepG2後,促凋亡(Bax)與抑凋亡蛋白(Bcl-2和Bcl-xl)的比率髮生改變,進而髮生凋亡.
목적 관찰Bcl-2 가족단백재Ad.mda-7개도HepG2세포조망중적변화,초보탐토Ad.mda-7 개도간암세포적조망궤제.방법 장휴대인MDA-7/IL-24기인적선병독전염HepG2화L02,통과사갑기우담리람염색법(MTT)급Hoechst염색관찰MDA-7/IL-24대간암세포HepG2화정상간배세포L02적생장억제화살상작용. Annexin V화PI 쌍염후류식세포의검측세포적조망.단백면역인적법(Western blot)검측Bcl-2가족단백적변화.결과 Ad.mda-7능명현억제간암세포HepG2적생장,단대정상간배세포L02몰유명현억제증식작용.Hoechst염색화류식세포의제시Ad.mda-7능명현유도간암세포HepG2세포적조망,단대정상간배세포L02몰유명현독부작용.Western blot설명억제조망적단백Bcl-2화Bcl-xl적표체재HepG2명현하강,재L02중칙몰유변화; 이촉조망단백Bax재HepG2화L02도승고.결론 Ad.mda-7전염HepG2후,촉조망(Bax)여억조망단백(Bcl-2화Bcl-xl)적비솔발생개변,진이발생조망.