CAJ | 학술논문

为获得耐1.5%NaCl的药蒲公英(Taraxacum officinale Weber)愈伤组织.以药蒲公英叶片外植体为材料诱导愈伤组织.以NaCl为选择因子.从愈伤组织直接筛选.在选择培养基上,大部分愈伤组织褐化死亡,个别褐化死亡的愈伤组织周围有少量新的细胞团长出,将其转接到新鲜的选择培养基上,每3周继代一次.经3个月继代筛选获得了耐1.5%NaCl的药蒲公英细胞团.以普通愈伤组织为对照,发现随着NaCl浓度升高,耐盐愈伤组织的相对生长率下降但显著高于对照;且随着盐胁迫处理时间延长持续升高,而普通愈伤组织对照几乎停止生长.说明耐盐愈伤组织具有相对稳定的耐盐性.在蛋白水平上,耐盐愈伤组织与对照愈伤组织差异明显,SDS-PAGE分析显示:耐盐愈伤组织比对照多出一条34 kD大小的蛋白带.且30 kD、18 kD左右的蛋白带明显上调.相同处理条件下耐盐愈伤组织脯氨酸的增加幅度高于对照.盐胁迫条件下,耐盐愈伤组织的超氧化物歧化酶(Super oxidasedimutase,SOD),过氧化物酶(Peroxidase,POD)和过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性明显高于对照.且随着处理时间的延长和盐浓度的增加呈现升高的趋势,而对照则呈现先升高后下降的趋势.结果说明耐盐愈伤组织一方面通过小分子有机溶质如脯氨酸的方式调节其渗透平衡,另一方面还可通过提高抗氧化能力降低盐分造成的次级伤害.积累蛋白也可能是耐盐愈伤组织调节渗透平衡的一种方式.通过生理生化分析确定我们获得的耐盐愈伤组织为耐盐变异体.
위획득내1.5%NaCl적약포공영(Taraxacum officinale Weber)유상조직.이약포공영협편외식체위재료유도유상조직.이NaCl위선택인자.종유상조직직접사선.재선택배양기상,대부분유상조직갈화사망,개별갈화사망적유상조직주위유소량신적세포단장출,장기전접도신선적선택배양기상,매3주계대일차.경3개월계대사선획득료내1.5%NaCl적약포공영세포단.이보통유상조직위대조,발현수착NaCl농도승고,내염유상조직적상대생장솔하강단현저고우대조;차수착염협박처리시간연장지속승고,이보통유상조직대조궤호정지생장.설명내염유상조직구유상대은정적내염성.재단백수평상,내염유상조직여대조유상조직차이명현,SDS-PAGE분석현시:내염유상조직비대조다출일조34 kD대소적단백대.차30 kD、18 kD좌우적단백대명현상조.상동처리조건하내염유상조직포안산적증가폭도고우대조.염협박조건하,내염유상조직적초양화물기화매(Super oxidasedimutase,SOD),과양화물매(Peroxidase,POD)화과양화경매(Catalase,CAT)활성명현고우대조.차수착처리시간적연장화염농도적증가정현승고적추세,이대조칙정현선승고후하강적추세.결과설명내염유상조직일방면통과소분자유궤용질여포안산적방식조절기삼투평형,령일방면환가통과제고항양화능력강저염분조성적차급상해.적루단백야가능시내염유상조직조절삼투평형적일충방식.통과생리생화분석학정아문획득적내염유상조직위내염변이체.