细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
9期
894-897
,共4页
人核迁移蛋白%单克隆抗体%巨核细胞
人覈遷移蛋白%單剋隆抗體%巨覈細胞
인핵천이단백%단극륭항체%거핵세포
目的: 制备人核迁移蛋白(hNudC )的单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性.方法: 从人胎肝组织中克隆得到 hNudC 基因, 构建重组表达质粒 pET-28b/hNudC, 表达带有6-His标记的重组hNudC, 用纯化的重组 hNudC 蛋白免疫 BALB/c小鼠制备mAb, 用ELISA筛选抗体阳性的细胞克隆, 用免疫荧光染色法及Western blot 试验鉴定 mAb 的特异性.结果: 获得2株杂交瘤细胞系2C16和2D8, 其分泌的mAb的 Ig亚类(型)分别为IgG1 和IgM(ê) , 杂交瘤细胞培养上清的ELISA效价分别为1∶ 64和1∶ 32; 腹水mAb的效价分别为1∶ 1×105和1∶ 5×104.mAb与重组hNudC蛋白有较强的特异性反应, 免疫荧光染色和Western blot试验证明, 制备的 mAb 可以识别人巨核系白血病细胞株 Dami、 Meg-01和人脐带血来源的CD41+巨核细胞中表达的 hNudC 蛋白.结论: 成功地制备了特异性抗 hNudC mAb, 为研究 hNudC 蛋白的功能、天然分布及异常表达奠定了基础.
目的: 製備人覈遷移蛋白(hNudC )的單剋隆抗體(mAb)併鑒定其特性.方法: 從人胎肝組織中剋隆得到 hNudC 基因, 構建重組錶達質粒 pET-28b/hNudC, 錶達帶有6-His標記的重組hNudC, 用純化的重組 hNudC 蛋白免疫 BALB/c小鼠製備mAb, 用ELISA篩選抗體暘性的細胞剋隆, 用免疫熒光染色法及Western blot 試驗鑒定 mAb 的特異性.結果: 穫得2株雜交瘤細胞繫2C16和2D8, 其分泌的mAb的 Ig亞類(型)分彆為IgG1 和IgM(ê) , 雜交瘤細胞培養上清的ELISA效價分彆為1∶ 64和1∶ 32; 腹水mAb的效價分彆為1∶ 1×105和1∶ 5×104.mAb與重組hNudC蛋白有較彊的特異性反應, 免疫熒光染色和Western blot試驗證明, 製備的 mAb 可以識彆人巨覈繫白血病細胞株 Dami、 Meg-01和人臍帶血來源的CD41+巨覈細胞中錶達的 hNudC 蛋白.結論: 成功地製備瞭特異性抗 hNudC mAb, 為研究 hNudC 蛋白的功能、天然分佈及異常錶達奠定瞭基礎.
목적: 제비인핵천이단백(hNudC )적단극륭항체(mAb)병감정기특성.방법: 종인태간조직중극륭득도 hNudC 기인, 구건중조표체질립 pET-28b/hNudC, 표체대유6-His표기적중조hNudC, 용순화적중조 hNudC 단백면역 BALB/c소서제비mAb, 용ELISA사선항체양성적세포극륭, 용면역형광염색법급Western blot 시험감정 mAb 적특이성.결과: 획득2주잡교류세포계2C16화2D8, 기분비적mAb적 Ig아류(형)분별위IgG1 화IgM(ê) , 잡교류세포배양상청적ELISA효개분별위1∶ 64화1∶ 32; 복수mAb적효개분별위1∶ 1×105화1∶ 5×104.mAb여중조hNudC단백유교강적특이성반응, 면역형광염색화Western blot시험증명, 제비적 mAb 가이식별인거핵계백혈병세포주 Dami、 Meg-01화인제대혈래원적CD41+거핵세포중표체적 hNudC 단백.결론: 성공지제비료특이성항 hNudC mAb, 위연구 hNudC 단백적공능、천연분포급이상표체전정료기출.
