中华内分泌代谢杂志
中華內分泌代謝雜誌
중화내분비대사잡지
CHINESE JOURNAL OF ENDOCRINOLOGY AND METABOLISM
2001年
4期
217-220
,共4页
基因表达%碘化物过氧化物酶(甲状腺过氧化物酶)%自身免疫疾病%甲状腺过氧化物酶抗体%甲状腺损伤
基因錶達%碘化物過氧化物酶(甲狀腺過氧化物酶)%自身免疫疾病%甲狀腺過氧化物酶抗體%甲狀腺損傷
기인표체%전화물과양화물매(갑상선과양화물매)%자신면역질병%갑상선과양화물매항체%갑상선손상
目的表达有抗原活性的人甲状腺过氧化物酶(hTPO)片段,并将表达产物用于临床测试.方法将hTPO抗原决定簇基因连入pGEX-4T-3,然后转入E. coli BL21,异丙基β-D-硫代半乳糖苷诱导表达.表达产物谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-hTPO经亲和层析纯化,并鉴定免疫学活性.以GST-hTPO为抗原建立检测血清TPO抗体(Ab)的ELISA方法.用此方法检测一批自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者血清TPOAb,用病理学方法观察同批患者甲状腺组织中HLA-DR抗原、树突状细胞及淋巴细胞浸润程度.结果成功地表达了hTPO抗原决定簇基因,纯化产物GST-hTPO纯度高,有良好的免疫学活性,以此抗原建立的ELISA方法有良好的重复性,CV在5.93%~7.59%之间.ELISA方法与RIA方法比较,检测结果显著相关(n=37,r=0.613,P<0.001).血清TPOAb水平及HLA-DR抗原、树突状细胞分布随甲状腺组织淋巴细胞浸润程度加重呈逐渐增多趋势.结论原核表达产物GST-hTPO可用于建立TPOAb常规检测方法;AITD患者血清TPOAb水平与甲状腺组织损伤有密切关系.
目的錶達有抗原活性的人甲狀腺過氧化物酶(hTPO)片段,併將錶達產物用于臨床測試.方法將hTPO抗原決定簇基因連入pGEX-4T-3,然後轉入E. coli BL21,異丙基β-D-硫代半乳糖苷誘導錶達.錶達產物穀胱甘肽巰基轉移酶(GST)-hTPO經親和層析純化,併鑒定免疫學活性.以GST-hTPO為抗原建立檢測血清TPO抗體(Ab)的ELISA方法.用此方法檢測一批自身免疫性甲狀腺疾病(AITD)患者血清TPOAb,用病理學方法觀察同批患者甲狀腺組織中HLA-DR抗原、樹突狀細胞及淋巴細胞浸潤程度.結果成功地錶達瞭hTPO抗原決定簇基因,純化產物GST-hTPO純度高,有良好的免疫學活性,以此抗原建立的ELISA方法有良好的重複性,CV在5.93%~7.59%之間.ELISA方法與RIA方法比較,檢測結果顯著相關(n=37,r=0.613,P<0.001).血清TPOAb水平及HLA-DR抗原、樹突狀細胞分佈隨甲狀腺組織淋巴細胞浸潤程度加重呈逐漸增多趨勢.結論原覈錶達產物GST-hTPO可用于建立TPOAb常規檢測方法;AITD患者血清TPOAb水平與甲狀腺組織損傷有密切關繫.
목적표체유항원활성적인갑상선과양화물매(hTPO)편단,병장표체산물용우림상측시.방법장hTPO항원결정족기인련입pGEX-4T-3,연후전입E. coli BL21,이병기β-D-류대반유당감유도표체.표체산물곡광감태구기전이매(GST)-hTPO경친화층석순화,병감정면역학활성.이GST-hTPO위항원건립검측혈청TPO항체(Ab)적ELISA방법.용차방법검측일비자신면역성갑상선질병(AITD)환자혈청TPOAb,용병이학방법관찰동비환자갑상선조직중HLA-DR항원、수돌상세포급림파세포침윤정도.결과성공지표체료hTPO항원결정족기인,순화산물GST-hTPO순도고,유량호적면역학활성,이차항원건립적ELISA방법유량호적중복성,CV재5.93%~7.59%지간.ELISA방법여RIA방법비교,검측결과현저상관(n=37,r=0.613,P<0.001).혈청TPOAb수평급HLA-DR항원、수돌상세포분포수갑상선조직림파세포침윤정도가중정축점증다추세.결론원핵표체산물GST-hTPO가용우건립TPOAb상규검측방법;AITD환자혈청TPOAb수평여갑상선조직손상유밀절관계.