CAJ | 학술논문

背景与目的:Bcl-2基因是一种重要的抑制细胞凋亡的基因,广泛存在于各种肿瘤细胞中.本研究利用短发夹RNA(shRNA)重组质粒抑制Bcl-2基因的表达,观察其对非小细胞肺癌NCI-H460的细胞凋亡和放射敏感性变化的影响.方法:将特异性抑制Bcl-2基因表达的干扰质粒Bcl-2/shRNA稳定转染NCI-H460细胞,获得H460-RNAi细胞,同时设转染含无义序列Neg-shRNA质粒的H460-Neg细胞及未转染的H460细胞为对照组,采用Western blot法,观察Bcl-2基因在蛋白表达水平的变化;X射线照射后,采用细胞形态学及克隆形成实验,检测RNA干扰对NCI-H460细胞凋亡和放射敏感性的影响.结果:H460-RNAi细胞的Bcl-2蛋白表达较对照组明显降低(P<0.05);H460-RNAi细胞的凋亡率[(10.8±0.7)%]明显高于对照组(P<0.05),4 Gy X线照射48 h后的凋亡率[(24.9±1.4)%]明显高于对照组(P<0.05)及未照射组(P<0.05):H460-RNAi细胞的存活参数D0、Dq、N和SF2值分别为0.97、0.75、2.18和0.26,均低于其余两组,而H460细胞组与H460-Neg细胞组比较差异无统计学意义(分别为1.39、1.39、2.72、0.52和1.21、1.28、2.87、0.46).结论:Bcl-2/shRNA重组质粒可以有效抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞的Bcl-2基因的表达,增强NCI-H460的细胞凋亡及放射敏感性.
배경여목적:Bcl-2기인시일충중요적억제세포조망적기인,엄범존재우각충종류세포중.본연구이용단발협RNA(shRNA)중조질립억제Bcl-2기인적표체,관찰기대비소세포폐암NCI-H460적세포조망화방사민감성변화적영향.방법:장특이성억제Bcl-2기인표체적간우질립Bcl-2/shRNA은정전염NCI-H460세포,획득H460-RNAi세포,동시설전염함무의서렬Neg-shRNA질립적H460-Neg세포급미전염적H460세포위대조조,채용Western blot법,관찰Bcl-2기인재단백표체수평적변화;X사선조사후,채용세포형태학급극륭형성실험,검측RNA간우대NCI-H460세포조망화방사민감성적영향.결과:H460-RNAi세포적Bcl-2단백표체교대조조명현강저(P<0.05);H460-RNAi세포적조망솔[(10.8±0.7)%]명현고우대조조(P<0.05),4 Gy X선조사48 h후적조망솔[(24.9±1.4)%]명현고우대조조(P<0.05)급미조사조(P<0.05):H460-RNAi세포적존활삼수D0、Dq、N화SF2치분별위0.97、0.75、2.18화0.26,균저우기여량조,이H460세포조여H460-Neg세포조비교차이무통계학의의(분별위1.39、1.39、2.72、0.52화1.21、1.28、2.87、0.46).결론:Bcl-2/shRNA중조질립가이유효억제비소세포폐암NCI-H460세포적Bcl-2기인적표체,증강NCI-H460적세포조망급방사민감성.