中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2005年
2期
128-132
,共5页
屈秋民%郭峰%乔晋%泽洋文%长岛和郎
屈鞦民%郭峰%喬晉%澤洋文%長島和郎
굴추민%곽봉%교진%택양문%장도화랑
JC病毒%入核转运%病毒样颗粒
JC病毒%入覈轉運%病毒樣顆粒
JC병독%입핵전운%병독양과립
目的探讨JC病毒(JCV)病毒样颗粒(VLP)是否可以直接转运进入细胞核. 方法应用JCV主要外壳蛋白VP1体外表达、重组VLP,在其表面标记异硫氰基荧光素(FITC),同时在其内部包裹荧光染料Cy3,感染培养的HeLa细胞和SVG细胞,荧光显微镜观察VLP入核转运. 结果 HeLa和SVG细胞感染包裹Cy3的FITC-VLP时,FITC与Cy3同时出现于细胞核内相同部位;而感染FITC-VP1与Cy3混合物时,FITC虽可在细胞核内检测到,但Cy3信号几乎消失.包裹Cy3的VLP用SDS-PAGE展开,荧光显像后行考马斯亮蓝(CBB)染色,发现Cy3和VLP移行至不同部位,证明Cy3不能与VP1结合,提示VLP以完整的颗粒形式转运进入细胞核.应用包裹外源性DNA的VLP感染培养的HeLa和SVG细胞,发现包裹的DNA在细胞浆和细胞核内均可检测到,提示JCV入核过程与VLP相同. 结论 VLP可以不经裂解直接转运进入细胞核,JCV入核转运可能与VLP相同.
目的探討JC病毒(JCV)病毒樣顆粒(VLP)是否可以直接轉運進入細胞覈. 方法應用JCV主要外殼蛋白VP1體外錶達、重組VLP,在其錶麵標記異硫氰基熒光素(FITC),同時在其內部包裹熒光染料Cy3,感染培養的HeLa細胞和SVG細胞,熒光顯微鏡觀察VLP入覈轉運. 結果 HeLa和SVG細胞感染包裹Cy3的FITC-VLP時,FITC與Cy3同時齣現于細胞覈內相同部位;而感染FITC-VP1與Cy3混閤物時,FITC雖可在細胞覈內檢測到,但Cy3信號幾乎消失.包裹Cy3的VLP用SDS-PAGE展開,熒光顯像後行攷馬斯亮藍(CBB)染色,髮現Cy3和VLP移行至不同部位,證明Cy3不能與VP1結閤,提示VLP以完整的顆粒形式轉運進入細胞覈.應用包裹外源性DNA的VLP感染培養的HeLa和SVG細胞,髮現包裹的DNA在細胞漿和細胞覈內均可檢測到,提示JCV入覈過程與VLP相同. 結論 VLP可以不經裂解直接轉運進入細胞覈,JCV入覈轉運可能與VLP相同.
목적탐토JC병독(JCV)병독양과립(VLP)시부가이직접전운진입세포핵. 방법응용JCV주요외각단백VP1체외표체、중조VLP,재기표면표기이류청기형광소(FITC),동시재기내부포과형광염료Cy3,감염배양적HeLa세포화SVG세포,형광현미경관찰VLP입핵전운. 결과 HeLa화SVG세포감염포과Cy3적FITC-VLP시,FITC여Cy3동시출현우세포핵내상동부위;이감염FITC-VP1여Cy3혼합물시,FITC수가재세포핵내검측도,단Cy3신호궤호소실.포과Cy3적VLP용SDS-PAGE전개,형광현상후행고마사량람(CBB)염색,발현Cy3화VLP이행지불동부위,증명Cy3불능여VP1결합,제시VLP이완정적과립형식전운진입세포핵.응용포과외원성DNA적VLP감염배양적HeLa화SVG세포,발현포과적DNA재세포장화세포핵내균가검측도,제시JCV입핵과정여VLP상동. 결론 VLP가이불경렬해직접전운진입세포핵,JCV입핵전운가능여VLP상동.
