CAJ | 학술논문

背景与目的:近几年的研究表明,端粒酶在肿瘤的发生中扮演着重要角色.人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse trascriptase,hTERT)是端粒酶活化的惟一限制性组分.本研究探讨hTERT全长cDNA反义序列转染对人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D恶性表型的逆转作用.方法:应用基因重组技术构建包含hTERTcDNA全长序列的反义hTERT真核表达载体pcDNA3.1(-)-hERT,用脂质体转染人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D,通过生长曲线比较转染反义hTERT后PLA-801D细胞的增殖能力,应用逆转录-聚合酶链反应方法检测hTERT mRNA的表达水平,并应用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法检测端粒酶活性.结果:成功地构建了pcDNA3.1(-)-hTERT的反义真核表达载体,并转入到PLA-801D细胞中.转染反义hTERT的细胞较未转染及转染空质粒细胞的生长增殖能力显著降低(P＜0.05);转染组细胞中野生型hTERT mRNA的表达被抑制,其相对表达量仅为对照组细胞的15.7%,转染组细胞中端粒酶活性较对照细胞下降了约82.4%.结论:hTERT cDNA的全长反义序列可以抑制PLA-801D细胞hTERT mRNA的表达水平和端粒酶活性,限制PLA-801D细胞的生长.
배경여목적:근궤년적연구표명,단립매재종류적발생중분연착중요각색.인단립매역전록매(human telomerase reverse trascriptase,hTERT)시단립매활화적유일한제성조분.본연구탐토hTERT전장cDNA반의서렬전염대인폐거세포암세포계PLA-801D악성표형적역전작용.방법:응용기인중조기술구건포함hTERTcDNA전장서렬적반의hTERT진핵표체재체pcDNA3.1(-)-hERT,용지질체전염인폐거세포암세포계PLA-801D,통과생장곡선비교전염반의hTERT후PLA-801D세포적증식능력,응용역전록-취합매련반응방법검측hTERT mRNA적표체수평,병응용단립중복서렬확증-매련면역흡부법검측단립매활성.결과:성공지구건료pcDNA3.1(-)-hTERT적반의진핵표체재체,병전입도PLA-801D세포중.전염반의hTERT적세포교미전염급전염공질립세포적생장증식능력현저강저(P＜0.05);전염조세포중야생형hTERT mRNA적표체피억제,기상대표체량부위대조조세포적15.7%,전염조세포중단립매활성교대조세포하강료약82.4%.결론:hTERT cDNA적전장반의서렬가이억제PLA-801D세포hTERT mRNA적표체수평화단립매활성,한제PLA-801D세포적생장.