CAJ | 학술논문

目的构建人源特异性抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab噬菌体抗体库.方法从抗乙型肝炎病毒表面抗体高滴度(1:1024)的人全血中分离外周血单个核细胞(PBMC),经RT-PCR分别扩增出轻链可变区和重链可变区,再以噬菌体质粒为模板分别扩增出轻链恒定区(Cκ)和重链恒定区(CH1),将轻链可变区和轻链恒定区(Cκ)及重链可变区和重链恒定区(CH1)进行第1次基因拼接,分别形成κ轻链和Fd重链,再以κ轻链和Fd重链作为模板进行第2次基因拼接,形成完整的Fab基因,与pComb3H-SS噬菌体质粒连接后,电穿孔转化大肠杆菌XL1-Blue.结果通过多次电穿孔转化,获得总容量为4×105库容的噬菌体抗体库.结论构建的Fab抗体库可用于筛选特异性抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子.
목적구건인원특이성항을형간염병독표면항원Fab서균체항체고.방법종항을형간염병독표면항체고적도(1:1024)적인전혈중분리외주혈단개핵세포(PBMC),경RT-PCR분별확증출경련가변구화중련가변구,재이서균체질립위모판분별확증출경련항정구(Cκ)화중련항정구(CH1),장경련가변구화경련항정구(Cκ)급중련가변구화중련항정구(CH1)진행제1차기인병접,분별형성κ경련화Fd중련,재이κ경련화Fd중련작위모판진행제2차기인병접,형성완정적Fab기인,여pComb3H-SS서균체질립련접후,전천공전화대장간균XL1-Blue.결과통과다차전천공전화,획득총용량위4×105고용적서균체항체고.결론구건적Fab항체고가용우사선특이성항을형간염병독표면항원Fab항체분자.